人腫瘤壞死因子a(TNF-a)ELISA檢測試劑盒
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人腫瘤壞死因子a(TNF-a)捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人腫瘤壞死因子a(TNF-a)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品(40ng/ml) | 0.5mL | 0.5mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
檢測抗體-HRP | 6mL | 3mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 20mL | 20mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無 |
注:標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液依次稀釋為:40、20、10、5、2.5、0ng/ml.
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體50μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:最低檢測濃度小于1.0 ng/ml。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個(gè)月
7. 檢測范圍:0.62ng/ml-40ng/ml
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,不同批號不可交換使用,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
本機(jī)用於測試紡織品,鞋類之外層、襯里、襯底和類似織物...等之耐摩性。可同時(shí)測試四個(gè)試片,測試時(shí)摩錘以變化性的方向(Lissajous),反復(fù)摩擦試片,在規(guī)定的摩擦次數(shù)下,測出其磨耗特性。? 符合標(biāo)準(zhǔn):BS-3424,ASTM-D4966,DIN-53863,SATRA TM31,ISO-20344
技術(shù)參數(shù) | |
荷重: | 595g,795g |
計(jì)數(shù): | LCD,0~999,999 |
體積(wxdxh): | 56.5×56.5×31.5cm |
重量: | 70kg |
電源: | 1∮,AC220V, 1.5 A |
弱酸 | 強(qiáng)酸 | 氫氟酸 | 堿 | 水溶液 | 溶劑 |
可用: | 推薦使用: | 不推薦使用: |
規(guī)格表 | ||||
貨號 | 容量 ml | 刻度 ml | 準(zhǔn)確度 A≤±% | 偏差 CV≤±% |
101.081-27 | 0.4~2 | 0.1 | ≤±0.3% | ≤±0.1% |
101.081-33 | 1~5 | 0.1 | ≤±0.3% | ≤±0.1%. |
101.081-38 | 2~10 | 0.2 | ≤±0.3% | ≤±0.1% |
101.081-44 | 6~30 | 0.5 | ≤±0.3% | ≤±0.1% |
101.081-48 | 10~50 | 1 | ≤±0.3% | ≤±0.1% |
101.081-51 | 20~100 | 2 | ≤±0.3% | ≤±0.1% |
101.081-53 | 40~200 | 5 | ≤±0.3% | ≤±0.1% |
101.081-56 | 60~300 | 5 | ≤±0.3% | ≤±0.1% |
101.081-58 | 100~500 | 5 | ≤±0.3% | ≤±0.1% |
校準(zhǔn):依據(jù)德國PTB校驗(yàn)程序,在儀器的最大量程之下,使用蒸餾水在20℃, 平順穩(wěn)定地操作測得的誤差極限。 A = 準(zhǔn)確度 , CV = 偏差系數(shù) |
Mobilgrease HTR,HTM,HTS and HTF Grease
美孚HTF極壓潤滑脂是高性能用與鋼廠典型水體污染條件下,露天采礦,非公路條件優(yōu)異的抗極壓潤滑脂。此外,美孚HTF極壓潤滑脂制定具有優(yōu)越的耐腐蝕性。
美孚HTM和HTR極壓潤滑脂提供良好的防水配方更能夠在中央系統(tǒng)提供良好的配藥特點(diǎn)和耐腐蝕性。復(fù)合鋰皂基結(jié)合先進(jìn)的添加劑系統(tǒng)提供高溫性能。美孚HTF極壓潤滑脂提供防火阻燃蓖麻和熱軋帶鋼軋機(jī)操作。
美孚高溫氣冷堆,熱媒,高溫超導(dǎo)和導(dǎo)熱油潤滑脂,主要推薦用于潤滑軸承,齒輪,凸輪彈流潤滑的要求,決定顯著的粘度貢獻(xiàn)。油脂棚磨水,繼續(xù)潤滑和幫助,形成了強(qiáng)大的密封,以抵御海水入侵。當(dāng)自由水進(jìn)入軸承,潤滑脂保持一致。他們的環(huán)保性能和原油粘度高,有助于減少磨損,使它們特別適合重沖擊負(fù)荷的適用。減少磨損,更換失靈軸承的維護(hù)成本會更低。它們也可以被用來在中央油脂配藥系統(tǒng)與表觀粘度的計(jì)算一致。
特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)美孚HTF極壓潤滑脂美孚品牌的產(chǎn)品,已經(jīng)獲得了享譽(yù)全球的創(chuàng)新和性能卓越的領(lǐng)導(dǎo)成員。美孚HTR潤滑脂產(chǎn)品的設(shè)計(jì)由?松梨诠局贫紟熀椭С治覀兊娜蚣夹g(shù)支持人員。美孚羥色胺的產(chǎn)品,專門滿足重型產(chǎn)品的客戶的要求:具有優(yōu)良的耐水性,高溫和凝聚力和粘接性能。這些潤滑脂具有以下特點(diǎn)和潛在的好處:
特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)及潛在效益。
高性能流體viscometrics選定添加劑和優(yōu)良的耐磨損重倉組件減少意外停機(jī)時(shí)間和降低了設(shè)備更換成本。
優(yōu)良的密封軸承,對海水入侵和中水的存在,以維持一致性的能力,較少的軸承故障造成水體污染,減少維護(hù)和更換成本。
卓越的耐腐蝕性降低維護(hù)和運(yùn)營成本非常好的保護(hù)軸承優(yōu)秀的油脂凝聚力,附著力和粘著性,在高溫和噴水的存在更好地留在惡劣環(huán)境下的性能,延長再潤滑潛力泵送性好,在低氣溫適中可用于集中油脂分布系統(tǒng)。
應(yīng)用美孚HTR主要是為了解決低溫泵送性挑戰(zhàn)。美孚的HTM提供額外的保護(hù),對海水入侵良好的泵送性。可以使用NLGI 2級潤滑脂,美孚HTS提供了最大的軸承的潤滑性能。美孚HTF提供防火阻燃蓖麻和熱軋帶鋼軋機(jī)操作。
美孚HTR,HTM,HTS和HTF潤滑脂主要用于潤滑軸承,齒輪,凸輪,需要高粘度基礎(chǔ)油。這種重型的應(yīng)用包括:
• 鋼軋機(jī)軸承。
• 非公路車輛。
• 地表采礦阻力線,挖掘機(jī),鉆機(jī)和長途車。
4WE6通徑單電4WE6A,B,C,D,Y4WE6通徑雙電E,H,J,W,L,M,Q,U,V,G帶V,B10,OF 以下為少量型號,具體型號選型請咨詢 6通經(jīng)電磁閥4WE6D62/EG24N9K4 4WE6D6X/EG24N9K4
4WE6D62/EW230N9K4 4WE6D6X/EW230N9K4 4WE6D6X/OFEG24N9K4 4WE6Y62/EG24N9K4 4WE6Y62/EW230N9K44WE6Y6X/EG24N9K4 4WE6Y6X/EW230N9K4
4WE6C62/EG24N9K4 4WE6C62/EW230N9K44WE6C6X/EG24N9K4 4WE6C6X/EW230N9K4
4WE6A62/EG24N9K4 4WE6A62/EW230N9K44WE6A6X/EG24N9K4 4WE6A6X/EW230N9K4
4WE6B62/EG24N9K4 4WE6B62/EW230N9K44WE6B6X/EG24N9K4 4WE6B6X/EW230N9K4
4WE6J62/EG24N9K4 4WE6J62/EW230N9K44WE6J6X/EG24N9K4 4WE6J6X/EW230N9K4
4WE6E62/EG24N9K4 4WE6E62/EW230N9K44WE6E6X/EG24N9K4 4WE6E6X/EW230N9K4
4WE6D6X/EG24N9K44WE6D62/EG24N9K44WE6D6X/OFEG220N9K44WE6D6X/OFEG24N9K44WE6D62/EG24N9K4/B104WE6D6X/EG24N9K4+Z5L4WE6D62/EG220N9K4/V 4WE6D70/HG24N9K44WE6J62/EG24N9K44WE6J6X/EG24N9K44WE6J6X/EG24N9K4+Z5L4WE6J62/EW230N9K4+Z5L4WE6E62/EG24N9K44WE6E6X/EG24N9K44WE6H62/EG24N9K44WE6H6X/EG24N9K44WE6HB6X/EG24N9K4 4WE6C62/EG24N9K44WE6G6X/EG24N9K44WE6Y61/EW230N9K44WE6Y61/EG220N9K4/V4WE6Y6X/EG220N9K44WE6Q6X/EG24N9K4/A124WE6PB6X/EG24N9K4
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