Mini Opticon熒光定量PCR儀
RG6500HRM熒光定量PCR儀
型號 RG6500HRM 通道 5+HRM 激發(fā)光源 6個LED 光源（綠、黃、橙、紅、紫紅、HRM） 激發(fā)波長 470nm,530nm,585nm,625nm,670nm,460nm（HRM） 檢測波長 510nm,555nm,610nm,660nm,710nm,510nmLP（HRM） 轉速 離心式、400RPM 樣品通量 36，72，100 線性范圍 12次方 溫度均一性 ±0.01℃ 溫度分辨率 ±0.02℃ 升降溫速率 10℃/s 控溫范圍 室溫－99℃ 檢測器 光電倍增管（PMT），靈敏度高 消耗品 0.2mLPCR管, 0.1mL管, genedisc72, genedisc100 尺寸 370mm×420mm×560mm（開門時）×275mm 重量 14kg 電腦 PentiumTMⅣ,2GHz，512RAM,Windows XP,USB或RS232接口 電源 100－120V@60Hz,200-240V@50Hz;功率消耗8VA（待機）
Rotor-Gene6000是Corbett公司一代的實時熒光定量PCR系統(tǒng)。它采用熒光標記的方法對基因進行PCR擴增，通過對熒光參數(shù)的測定分析基因的拷貝數(shù)從而定量計算擴增發(fā)生前的原始基因拷貝數(shù)。該儀器可以用于基因的表達調控分析、細菌和病毒的快速分型和鑒定、轉基因動植物的檢測、食品中病原微生物的檢測。該儀器同時具備高分辨率熔解（HRM）分析功能，可通過高分辨率熔解曲線進行突變檢測、SNP分析、等基因型、HLA配型檢測、突變發(fā)現(xiàn)等工作。
除RG6500HRM之外，RG6000系列還有另外四個型號，分別為：RG6200，RG6200HRM， RG6500， RG6600。
熒光定量PCR儀燈泡L6420-F 12V75W美國ABI 7300/7500
熒光定量PCR儀燈泡L6420-F 12V75W美國ABI 7300/7500日本富士能VP-4400電子胃鏡燈泡HLX64634 15V150Wolympus奧林巴斯胃鏡燈泡15V150W MD-151 JCM 15V-150W FPBOSHIN JCR 7.5V48W LM-EB50-B專用燈泡PHILIPS胃鏡燈泡6423FO 15V150WOSRAM胃鏡燈泡64634HLX 15V150WOLYMPUS顯微鏡專用燈泡 6V30W 5761美國哈希1720E/1720D低量程濁度儀專用燈泡美國哈希1900C/2100P濁度儀專用燈泡美國哈希2100Q/2100N/2100AN濁度儀專用燈泡美國哈希DR2800/DR2700/DR5000分光光度計專用鎢燈美國哈希DR5000分光光度計專用氘燈OSRAM熒光顯微鏡燈泡HBO 100W/2 HBO 100W/2OLYMPUS倒置顯微鏡燈泡 LS-30尼康 Nikon 20533 顯微鏡燈泡 jcr 6V20W燈杯 棱杯 MR11奧林巴斯OLYMPUS,CK,LSM/N/P顯微鏡燈泡6V 2A GB-4,3-6V2A GB-4Leica/Leitz顯微鏡燈泡 型號如下，燈泡型號：ZEISS蔡司顯微鏡燈泡HLWS5-A 6V 25W,NARVA 55147金屬片米泡光源尼康NIKON,LEITZ,LEICA顯微鏡用6V 15W卡口燈泡,優(yōu)秀USHIO 8018JENA蔡司ZEISS生物醫(yī)學顯微鏡燈泡ASL 55147帶金屬片6V 25W光源LEICA萊卡384-643 手術顯微鏡燈泡384643 12V50W 徠卡HLX4643 OSRAM熒光顯微鏡燈泡HBO 103W/2 HBO 103W/2OSRAM 熒光顯微鏡燈泡HBO 50W AC HBO 50W/AC賓德內窺鏡專用（橫插）用燈泡21V150W原裝富士能FUJI EFN 12V75W Fujinon88胃鏡內窺鏡燈泡瑞士HS900-930裂隙燈眼科燈泡OP2366 6V4.5A Japan奧林巴斯olympus CHK-220V20WSB 顯微鏡燈泡OLYMPUS奧林巴斯纖維喉鏡,支氣管插管鏡燈泡MAJ-525,2.5V0.7AOLYMPUS奧林巴斯LS-30,6V30W倒置顯微鏡燈泡OLYMPUS老式顯微鏡燈泡6V5A TB-1，6-8V5A模擬定位機及KOWA檢眼鏡SL5用1030K1001,HOSOBUCHI的12V 20W燈泡豪斯瓷HOSOBUCHI光學燈泡OP2105 6V 2A,BA15D雙觸點鎢絲燈Kenswick 22.8V120W手術無影燈燈泡（東莞市毅邁光源照明有限公司 李小姐 13652554836 13538334922 QQ:932502495 321202867）
ABI Prism 7300ABI 7300實時熒光定量PCR儀
產(chǎn)品簡介:7300型實時熒光定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7300將PCR熱循環(huán)，熒光檢測和各種應用分析軟件結合在一起，可以動態(tài)觀察PCR每一循環(huán)各反應管中PCR擴增產(chǎn)物逐漸增加的情況。PCR實驗結束后可以馬上得到定量結果，無需凝膠電泳分析，無需純化PCR產(chǎn)物，無需進行任何實驗操作。7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)采用96孔反應板或單個及8聯(lián)管，反應體積25-100微升，實驗可以在不到2小時內結束。與其他人工基因定量分析方法如Northern blotting or RNase-protection assays相比，7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)具有時間省，靈敏度高，性好和線性范圍寬等優(yōu)點。7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)由全球實時定量PCR技術的—美國應用生物系統(tǒng)公司于2004年1月推出，它質量，實驗結果可信，性能價格比極其。實時定量PCR的主要應用:實時定量PCR應用廣泛，包括基于相對定量分析的基因表達分析，以標準曲線為基礎的病原體絕對定量分析，定性的PCR擴增后核酸序列的SNP基因型分析，以及以陽性內對照為基礎的陽性/陰性結果判定。實時定量PCR系統(tǒng)分析軟件:7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)軟件采用Windows XP®操作系統(tǒng)，進行儀器控制，數(shù)據(jù)收集和數(shù)據(jù)分析，軟件功能強大，界面友好，包括如下特色：· 反應板設置指南，使實驗設計非常簡單，即使是復雜的多重定量實驗也是如此。 · 擴增反應曲線的實時監(jiān)測 · 自動設定熒光基線，自動計算熒光閾值使實驗結果分析大大簡化 · 采用標準曲線進行靶基因的絕對定量 · 基因表達相對定量軟件提供強大的結果分析顯示，可以自動將多達10塊96孔板基因表達實驗的數(shù)據(jù)同時分析，并自動去除無關項數(shù)據(jù)，該軟件為選購件 · 自動SNP分型軟件以直觀的圖表輸出分型結果并自動進行分型質量評分 · 解離曲線數(shù)據(jù)采集操作簡單觀察方便，可以在儀器運行時觀察解離曲線數(shù)據(jù) · 觀察實時擴增曲線時可以非常方便的標定所對應的樣品孔位置 · 光源使用時間監(jiān)測及儀器系統(tǒng)自我診斷程序 熒光信號檢測:7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的全部96個樣品孔同時被鹵鎢燈激發(fā)，激發(fā)的熒光通過四色光學濾鏡后到達CCD照相機檢測信號。四色濾光片能夠地分辨包括FAM™/SYBR® Green I,VIC™/JOE™,TAMRA™,和ROX™在內的多種熒光染料。多色熒光檢測技術可實現(xiàn)多重定量、SNPs基因型分型和帶有內部陽性對照的陰/陽性分析成為可能。
公司信息：上海智巖科學儀器有限公司上海浦東張江高科技園區(qū)蔡倫路780號藥谷大廈 聯(lián)系人：王小姐電話：18930017069服務熱線：400-889-3700Email: zhiyanlab@163.com
基礎型PCR儀，基礎型PCR儀，梯度型PCR儀，實時熒光定量PCR儀
KEG800基礎型PCR儀（科研及教學專用）
儀器特點：
1）. 四路獨立控制半導體技術；
2）.高清晰超大觸摸屏，觸摸控制；
3）. Windows CE操作系統(tǒng)，人性化操作界面；
4）. LAN聯(lián)機功能，可由電腦控制30臺儀器同時工作；
5）. 本地網(wǎng)絡內文件數(shù)據(jù)共享功能；
6）. 無線藍牙打印功能，輕松準確記錄實驗數(shù)據(jù)；
7）. 支持通用USB flash，能無限擴充程序數(shù)據(jù)；
8）. 斷電數(shù)據(jù)保護功能；
9）. 友好的外型結構設計，強烈的立體視覺沖擊；
10）. 無級可調式熱蓋，能適應不同高度試管；
11）. 高密封反應區(qū)，確保實驗穩(wěn)定可靠；
12）. 可更換多種模塊，操作簡單。
KEG800基礎型PCR儀（科研及教學專用）性能指標：
| 產(chǎn)品型號 | KEG800 基礎型 |
| 樣本容量 Capacity | 96×0.2ml , 60×0.5ml , Double 48×0.2ml , |
| 48×0.2ml+30×0.5ml,384well , In-situ Plate | |
| 溫度范圍 Temperature Range | 0～100℃ |
| 最大升溫速率 Heating Rate | 4℃/s |
| 最大降溫速率 Cooling Rate | 3℃/s |
| 溫度均勻性 Uniformity | ≤±0.2℃ |
| 溫度準確性 Accuracy | ≤±0.1℃ |
| 溫度顯示分辨率 Display Resolution | 0.1℃ |
| 溫度控制方式 Temperature Control | Block\\\\Tube |
| 變溫速率可調 Ramping Rate Adjustale | 0.1～2.5℃ |
| 熱蓋溫度范圍 Hot Lid Temperature | 30～110℃ |
| 熱蓋高度調節(jié) Hot Lid Height Adjustale | 無級可調 Stepless Adjustable |
| 程序存儲數(shù)量 Number of Programs | 1000 +（USB FLASH） |
| 程序最大步驟 Max.No.of Step | 30 |
| 程序最大循環(huán)數(shù) Max.No.of Cycle | 100 |
| 時間遞增/遞減 Time Increment/Decrement | 1 Sec ～ 9 Min 59 Sec |
| 溫度遞增/遞減 Temp. Increment/Decrement | 0.1～9.9℃ |
| 程序暫停功能 Pause Funcation | 有 Yes |
| 掉電數(shù)據(jù)保護 Auto Data Protection | 有 Yes |
| 4℃保溫 Hold at 4℃ | 無限長 Forever |
| 語言設置功能 Language | 中文/English |
| 打印功能 Print | 有 Yes |
| 聯(lián)機功能 LAN to computer | 有 Yes |
| 液晶顯示屏 LCD | 8 inch，800×600 pels, TFT |
| 通訊接口 Communication | USB2.0 , LAN |
| 產(chǎn)品尺寸 Dimensions | 380mm×240mm×260mm （L×W×H） |
| 產(chǎn)品凈重 Weight | 8.5kg |
| 輸入電源 Power Supply | 85～264VAC , 47～63Hz , 600 W |
相關產(chǎn)品：基礎型PCR儀，梯度型PCR儀，實時熒光定量PCR儀，多用途PCR儀，專業(yè)原位型PCR儀，基因擴增儀，快速梯度PCR儀，個人型PCR儀，迷你型實時熒光定量PCR儀，雙模塊梯度型PCR儀，智能梯度PCR儀，96孔梯度PCR儀，PCR擴增儀，原位PCR儀，全自動基因擴增儀，雙槽雙梯度PCR儀，干式恒溫PCR儀，96孔多功能PCR儀，半自動熒光定量PCR儀，PCR儀價格，PCR儀品牌，PCR儀原理，PCR儀種類
MiniOpticon熒光定量PCR儀
3.1.1 雙色熒光PCR系統(tǒng)，而在一個反應孔中，可以同時檢測兩個不同波長的熒光信號
3.1.2 具有動態(tài)溫度梯度功能，可以同時運行8個不同的溫度；梯度溫度孵育時間相同
3.1.3 4臺設備可以同時連由一臺電腦控制3.2 技術要求 3.2.1 樣品容量：48x0.2mL
3.2.2 反應體積：10-100μL
3.2.3 光源：48個發(fā)光二極管（LED）陣列
3.2.4 檢測器：2個分光光敏二極管（PDT）
3.2.5 激發(fā)波長：470-500nm
3.2.6 檢測波長：通道1：523-543nm；通道2：540-700nm
3.2.7 檢測靈敏度：能檢測人類基因組中的單拷貝基因
3.2.8 動態(tài)溫度梯度功能：同時運行8個不同的溫度
ABI 7500實時熒光定量PCR儀
· 五色熒光檢測,應用更廣泛全面，包括：基因表達分析，病原體絕對定量分析，SNP基因型分析以及以陽性內對照為基礎的陽性/陰性結果判定· 新型光路設計支持更多的熒光標記檢測，包括：FAM™/SYBR® Green I, VIC®/JOE, NED™/ TAMRA™/ Cy3®, ROX™/Texas Red®,和Cy5®; 更好的激發(fā)光源設計使長波長紅色熒光的檢測靈敏度大大提高· 強大而靈活的反應板設置指南軟件使反應板設置非常方便，先進的實驗結果顯示與自動分析工具使實驗數(shù)據(jù)的分析處理更簡單直觀· 最新型半導體熱循環(huán)系統(tǒng)支持96孔板和單一0.2ml反應管。· 將來可以升級至超速定量PCR反應模式，大大縮短定量PCR反應時間· 體積小，采用手提電腦或臺式電腦，適用于任何空間的實驗室。 產(chǎn)品簡介:7500型實時定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7500將PCR熱循環(huán)，熒光檢測和各種應用分析軟件結合在一起，可以動態(tài)觀察PCR每一循環(huán)各反應管中PCR擴增產(chǎn)物逐漸增加的情況。PCR實驗結束后可以馬上得到定量結果，無需凝膠電泳分析，無需純化PCR產(chǎn)物，無需進行任何實驗操作。7500型實時熒光定量PCR儀采用96孔反應板或單個及8聯(lián)管，反應體積25-100微升，實驗可以在不到2小時內結束。與其他人工基因定量分析方法如Northern blotting or RNase-protection assays相比，7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)具有時間省，靈敏度高，準確性好和線性范圍寬等優(yōu)點。7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)由全球實時定量PCR技術的領導者—美國應用生物系統(tǒng)公司于2004年1月最新推出，它質量優(yōu)異，實驗結果準確可信，性能價格比極其優(yōu)越。實時定量PCR的主要應用:實時定量PCR應用廣泛，包括基于相對定量分析的基因表達分析，以標準曲線為基礎的病原體絕對定量分析，定性的PCR擴增后核酸序列的SNP基因型分析，以及以陽性內對照為基礎的陽性/陰性結果判定快速熱循環(huán)7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的標準模式采用25-100微升反應體積，可以采用96孔板或單管/8聯(lián)管進行實驗反應。另外7500還可以升級為快速熱循環(huán)樣品基座，該升級為選購件，由AB公司工程師負責安裝。快速熱循環(huán)樣品基座采用新型96孔反應板，這種反應板的管內液體上方的空間較小，可以支持5-30微升反應體積的實驗。采用樣品基座升級后的7500，新型96孔反應板和新型快速熱循環(huán)定量PCR預混試劑，實時定量PCR實驗可以在40分鐘內完成，實驗效果與標準2小時模式完全一致。.實時定量PCR系統(tǒng)分析軟件:7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)軟件采用Windows XP®操作系統(tǒng)，進行儀器控制，數(shù)據(jù)收集和數(shù)據(jù)分析，軟件功能強大，界面友好，包括如下特色：*反應板設置指南，使實驗設計非常簡單，即使是復雜的多重定量實驗也是如此。 *擴增反應曲線的實時監(jiān)測 *自動設定熒光基線，自動計算熒光閾值使實驗結果分析大大簡化 *采用標準曲線進行靶基因的絕對定量 *基因表達相對定量軟件提供強大的結果分析顯示，可以自動將多達10塊96孔板基因表達實驗的數(shù)據(jù)同時分析，并自動去除無關項數(shù)據(jù)，該軟件為選購件 *自動SNP分型軟件以直觀的圖表輸出分型結果并自動進行分型質量評分 *解離曲線數(shù)據(jù)采集操作簡單觀察方便，可以在儀器運行時觀察解離曲線數(shù)據(jù) *觀察實時擴增曲線時可以非常方便的標定所對應的樣品孔位置 *光源使用時間監(jiān)測及儀器系統(tǒng)自我診斷程序 熒光信號檢測:7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的全部96個樣品孔采用同一鹵鎢燈作為光源，鹵鎢燈光通過五色光源濾光片后激發(fā)每一個分析樣品。鹵鎢燈光源增加光源濾光片后改善了長波長紅色熒光標記的激發(fā)效果，可以大大提高紅色熒光檢測的靈敏度和定量分析的準確性。激發(fā)后的熒光再通過五色熒光濾光片到達CCD照相機檢測信號。五色熒光濾光片能夠有效地分辨包括：FAM™/SYBR® Green I, VIC®/JOE, NED™/TAMRA™/ Cy3®, ROX™/Texas Red®和Cy5®在內的多種熒光染料。
儀器技術指標
| 熱循環(huán)系統(tǒng) | 新型半導體，96個樣品孔,可以升級到96孔快速熱循環(huán)樣品基座 | |
| 光學系統(tǒng) | 5色激發(fā)光源，5色熒光濾光片和超低溫CCD成像系統(tǒng) | |
| Run Variables | 標準運行模式 | 快速運行模式 |
| 定量PCR運行時間 | 2 小時 | <40分鐘 |
| 樣品管類型 | 96孔板或0.2-mL單管 | 96孔板 |
| 反應體積 | 25–100 微升 | 5–30微升 |
電腦技術指標:美國應用生物系統(tǒng)公司為7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)提供配套的Dell™商用系列電腦（客戶可以選擇手提電腦或臺式電腦），有關電腦的最新配置，請訪問我公司網(wǎng)站：www.appliedbiosystems.com.安裝技術指標:在使用TaqMan®的RNA合成酶P儀器安裝板的情況下，7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)能夠區(qū)分5，000和10，000模板拷貝數(shù)，其置信度高達99.7%儀器性能:7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)經(jīng)過驗證可以達到如下性能目標：· 9個數(shù)量級的線性范圍· 可以檢測50ul反應體積單一報告熒光TaqMan實驗中僅10個起始拷貝數(shù)的模板，其置信度高達99.7%試劑與消耗品:7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)可使用全套定量PCR試劑與消耗品，包括：TaqMan® PCR通用預混試劑, SYBR® Green I預混試劑,96孔反應板及0.2ml反應管 TaqMan® Assays-on-Demand™ ａnd TaqMan® Assays-by-Design™應用試劑盒:美國應用生物系統(tǒng)公司為7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)提供各種配套的TaqMan定量PCR應用試劑盒,這些試劑盒均經(jīng)過嚴格的質量控制，可以拿來直接使用。試劑盒內容 具體應用目的 試劑盒類型基因表達試劑盒 SNP基因分型試劑盒TaqMan® Assays by Design™ Products(代客設計合成) 有 有TaqMan® Assays-on-Demand™ Products(成套標準試劑) 有 有基因組類型 試劑盒的種類總數(shù) 人基因 >21,500種 >156,500種小鼠基因 >13,000種 N/A大鼠基因 >3,500種 N/A訂貨網(wǎng)址 www.allgenes.com/ www.allsnps.com/儀器主機和電腦的大小重量:大小 7500 主機 手提式電腦 臺式電腦 寬 34 cm (13.39 in.) 32 cm (12.4 in.) 18 cm (7.1 in.)深 45 cm (17.72 in.) 26 cm (10.1 in.) 45 cm (17.6 in.)高 49 cm (19.29 in.) 3 cm (1.2 in. closed)42 cm (16.7 in.)重量 34 kg (75 lb) 2.1 kg (4.7 lb) 32 kg (70 lb)售后維修與免費保修期:7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的免費保修期為一年？蛻艨梢赃x擇常規(guī)安裝儀器，或選購公司的安裝試劑包由公司專家進行現(xiàn)場實驗測試和儀器校正。 應用技術支持:公司技術應用專家和科學家為全球客戶提供應用技術支持服務
北京GR/TL988熒光定量PCR儀使用方法
熒光定量PCR儀 傳染病診斷儀
型號：GR/TL988
北京GR/TL988熒光定量PCR儀使用方法應用領域臨床疾病診斷:各型肝炎、艾滋病、禽流感、結核、性病等傳染病診斷和療效評價;地中海貧血、血友病、性別發(fā)育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優(yōu)生優(yōu)育檢測;腫瘤標志物及瘤基因檢測實現(xiàn)腫瘤病診斷;遺傳基因檢測實現(xiàn)遺傳病診斷。
北京GR/TL988熒光定量PCR儀使用方法動物疾病檢測:禽流感、新城疫、口蹄疫、豬瘟、沙門菌、大腸埃希菌、胸膜肺炎放線桿菌、寄生蟲病等、炭疽芽孢桿菌。
北京GR/TL988熒光定量PCR儀使用方法食品安全:食源微生物、食品過敏源、轉基因、乳品企業(yè)阪崎腸桿菌等檢測。
科學研究:醫(yī)學、農(nóng)牧、生物相關分子生物學定量研究。
應用行業(yè):各級各類醫(yī)療機構、大學及研究所、CDC、檢驗檢疫局、獸醫(yī)站、食品企業(yè)及乳品廠等。
實時熒光定量PCR的出現(xiàn)，極大地簡化了定量檢測的過程，而且真正實現(xiàn)了絕對定量。多種檢測系統(tǒng)的出現(xiàn)，使實驗的選擇性更強。自動化操作提高了工作效率，反應快速、重復性好、靈敏度高、特異性強、結果清晰。隨著生物芯片技術和熒光探針定量技術的結合，熒光定量PCR在醫(yī)學檢測及其他各個領域中的應用前景將更加廣闊，令人欣喜。盡管如此我們也應清晰認識到，F(xiàn)Q-PCR技術在我國各個研究領域的應用并不多見，這就需要我國學者迎頭趕上，使FQ-PCR技術更充分地推廣，以推動研究工作的快速發(fā)展。
熒光定量PCR 實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lv仿，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lv仿相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
1)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 μg RNA/ml。樣品RNA濃度(μg/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 μg/ml。具體計算如下:
RNA溶于40 μl DEPC水中，取5ul，1:100稀釋至495μl的TE中，測得A260 = 0.21
RNA 濃度= 0.21 ×100 ×40 μg/ml = 840 μg/ml 或 0.84 μg/μl
取5ul用來測量以后，剩余樣品RNA為35 μl，剩余RNA總量為:
35 μl × 0.84 μg/μl = 29.4 μg
②純度檢測
RNA溶液的A260/A280的比值即為RNA純度，比值范圍1.8到2.1。
2)變性瓊脂糖凝膠電泳測定
①制膠
1g瓊脂糖溶于72ml水中，冷卻至60℃，10 ml的10× MOPS電泳緩沖液和18 ml的37% 甲醛溶液(12.3 M)。
10×MOPS電泳緩沖液
濃度 成分
0.4M MOPS，pH 7.0
0.1M 乙酸鈉
0.01M EDTA
灌制凝膠板，預留加樣孔至少可以加入25 μl溶液。膠凝后取下梳子，將凝膠板放入電泳槽內，加足量的1×MOPS電泳緩沖液至覆蓋膠面幾個毫米。
②準備RNA樣品
取3μgRNA，加3倍體積的甲醛上樣染液，加EB于甲醛上樣染液中至終濃度為10μg/ml。加熱至70℃孵育15分鐘使樣品變性。
③電泳
上樣前凝膠須預電泳5min，隨后將樣品加入上樣孔。5–6V/cm電壓下2h，電泳至溴酚蘭指示劑進膠至少2–3cm。
④紫外透射光下觀察并拍照
28S和18S核糖體RNA的帶非常亮而濃(其大小決定于用于抽提RNA的物種類型)，上面一條帶的密度大約是下面一條帶的2倍。還有可能觀察到一個更小稍微擴散的帶，它由低分子量的RNA(tRNA和5S核糖體RNA)組成。在18S和28S核糖體帶之間可以看到一片彌散的EB染色物質，可能是由mRNA和其它異型RNA組成。RNA制備過程中如果出現(xiàn)DNA污染，將會在28S核糖體RNA帶的上面出現(xiàn)，即更高分子量的彌散遷移物質或者帶，RNA的降解表現(xiàn)為核糖體RNA帶的彌散。用數(shù)碼照相機拍下電泳結果。
7500二手ABI 7500型實時熒光定量PCR儀
· 五色熒光檢測,應用更廣泛全面，包括：基因表達分析，病原體絕對定量分析，SNP基因型分析以及以陽性內對照為基礎的陽性/陰性結果判定· 新型光路設計支持更多的熒光標記檢測，包括：FAM™/SYBR® Green I, VIC®/JOE, NED™/ TAMRA™/ Cy3®, ROX™/Texas Red®,和Cy5®; 更好的激發(fā)光源設計使長波長紅色熒光的檢測靈敏度大大提高· 強大而靈活的反應板設置指南軟件使反應板設置非常方便，先進的實驗結果顯示與自動分析工具使實驗數(shù)據(jù)的分析處理更簡單直觀· 最新型半導體熱循環(huán)系統(tǒng)支持96孔板和單一0.2ml反應管。· 將來可以升級至超速定量PCR反應模式，大大縮短定量PCR反應時間· 體積小，采用手提電腦或臺式電腦，適用于任何空間的實驗室。 產(chǎn)品簡介:7500型實時定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7500將PCR熱循環(huán)，熒光檢測和各種應用分析軟件結合在一起，可以動態(tài)觀察PCR每一循環(huán)各反應管中PCR擴增產(chǎn)物逐漸增加的情況。PCR實驗結束后可以馬上得到定量結果，無需凝膠電泳分析，無需純化PCR產(chǎn)物，無需進行任何實驗操作。7500型實時熒光定量PCR儀采用96孔反應板或單個及8聯(lián)管，反應體積25-100微升，實驗可以在不到2小時內結束。與其他人工基因定量分析方法如Northern blotting or RNase-protection assays相比，7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)具有時間省，靈敏度高，準確性好和線性范圍寬等優(yōu)點。7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)由全球實時定量PCR技術的領導者—美國應用生物系統(tǒng)公司于2004年1月最新推出，它質量優(yōu)異，實驗結果準確可信，性能價格比極其優(yōu)越。實時定量PCR的主要應用:實時定量PCR應用廣泛，包括基于相對定量分析的基因表達分析，以標準曲線為基礎的病原體絕對定量分析，定性的PCR擴增后核酸序列的SNP基因型分析，以及以陽性內對照為基礎的陽性/陰性結果判定快速熱循環(huán)7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的標準模式采用25-100微升反應體積，可以采用96孔板或單管/8聯(lián)管進行實驗反應。另外7500還可以升級為快速熱循環(huán)樣品基座，該升級為選購件，由AB公司工程師負責安裝？焖贌嵫h(huán)樣品基座采用新型96孔反應板，這種反應板的管內液體上方的空間較小，可以支持5-30微升反應體積的實驗。采用樣品基座升級后的7500，新型96孔反應板和新型快速熱循環(huán)定量PCR預混試劑，實時定量PCR實驗可以在40分鐘內完成，實驗效果與標準2小時模式完全一致。.實時定量PCR系統(tǒng)分析軟件:7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)軟件采用Windows XP®操作系統(tǒng)，進行儀器控制，數(shù)據(jù)收集和數(shù)據(jù)分析，軟件功能強大，界面友好，包括如下特色：*反應板設置指南，使實驗設計非常簡單，即使是復雜的多重定量實驗也是如此。 *擴增反應曲線的實時監(jiān)測 *自動設定熒光基線，自動計算熒光閾值使實驗結果分析大大簡化 *采用標準曲線進行靶基因的絕對定量 *基因表達相對定量軟件提供強大的結果分析顯示，可以自動將多達10塊96孔板基因表達實驗的數(shù)據(jù)同時分析，并自動去除無關項數(shù)據(jù)，該軟件為選購件 *自動SNP分型軟件以直觀的圖表輸出分型結果并自動進行分型質量評分 *解離曲線數(shù)據(jù)采集操作簡單觀察方便，可以在儀器運行時觀察解離曲線數(shù)據(jù) *觀察實時擴增曲線時可以非常方便的標定所對應的樣品孔位置 *光源使用時間監(jiān)測及儀器系統(tǒng)自我診斷程序 熒光信號檢測:7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的全部96個樣品孔采用同一鹵鎢燈作為光源，鹵鎢燈光通過五色光源濾光片后激發(fā)每一個分析樣品。鹵鎢燈光源增加光源濾光片后改善了長波長紅色熒光標記的激發(fā)效果，可以大大提高紅色熒光檢測的靈敏度和定量分析的準確性。激發(fā)后的熒光再通過五色熒光濾光片到達CCD照相機檢測信號。五色熒光濾光片能夠有效地分辨包括：FAM™/SYBR® Green I, VIC®/JOE, NED™/TAMRA™/ Cy3®, ROX™/Texas Red®和Cy5®在內的多種熒光染料。
儀器技術指標| 熱循環(huán)系統(tǒng) | 新型半導體，96個樣品孔,可以升級到96孔快速熱循環(huán)樣品基座 | |
| 光學系統(tǒng) | 5色激發(fā)光源，5色熒光濾光片和超低溫CCD成像系統(tǒng) | |
| Run Variables | 標準運行模式 | 快速運行模式 |
| 定量PCR運行時間 | 2 小時 | <40分鐘 |
| 樣品管類型 | 96孔板或0.2-mL單管 | 96孔板 |
| 反應體積 | 25–100 微升 | 5–30微升 |
安裝技術指標:
在使用TaqMan®的RNA合成酶P儀器安裝板的情況下，7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)能夠區(qū)分5，000和10，000模板拷貝數(shù)，其置信度高達99.7%儀器性能:7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)經(jīng)過驗證可以達到如下性能目標：· 9個數(shù)量級的線性范圍· 可以檢測50ul反應體積單一報告熒光TaqMan實驗中僅10個起始拷貝數(shù)的模板，其置信度高達99.7%7500主機尺寸 34x45x49cm重量 34kgJC512-TL988-Ⅰ實時熒光定量PCR儀 實時熒光定量PCR設備 實時熒光定量PCR器
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