小鼠前列腺素E2(PGE2)酶聯(lián)免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中前列腺素E2(PGE2)的含量。
實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠前列腺素E2(PGE2)水平。用純化的小鼠前列腺素E2(PGE2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入前列腺素E2(PGE2),再與HRP標(biāo)記的前列腺素E2(PGE2)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的前列腺素E2(PGE2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠前列腺素E2(PGE2)濃度。
試劑盒組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品:360pg/ml | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在第一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為240pg/ml,160pg/ml ,80pg/ml L,40pg/ml , 20pg/ml)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
計算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋
倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
(此圖僅供參考)
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%
檢測范圍:
5pg/ml - 300pg/ml
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
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標(biāo)準(zhǔn)配置:。
售后服務(wù):
,可免費(fèi)提供備用機(jī)器
(終身制)
3H-2000A型快速比表面分析儀參數(shù)規(guī)格 : |
3H-2000A型快速比表面分析儀主要優(yōu)點(diǎn): |
3H-2000A型快速比表面分析儀測試報告: |
TF102壓縮空氣流量計是Sailsors基于熱式質(zhì)量流量原理設(shè)計的,直接測量出質(zhì)量流量,測量結(jié)果不受壓力與溫度變化的影響。其高性,高精度的標(biāo)準(zhǔn)化管道設(shè)計將熱式原理測量流量的優(yōu)勢:寬量程比,高靈敏度與低成本,高精度發(fā)揮的淋漓盡致。每一款TF102壓縮空氣流量計都設(shè)有兩個開關(guān)量信號,開關(guān)量可以在量程段任意設(shè)置,對檢測壓縮空氣的泄露量非常敏感,因此說TF102也是一款的檢漏儀。 測量壓縮空氣在目前的市場上有很多產(chǎn)品,其實熱式原理是最,最經(jīng)濟(jì)的一種。因此它具有極低的成本和極高的性: | |
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產(chǎn)品型號 | HPS2610D |
性能指標(biāo) | |
顯示器 | 高清LCD液晶顯示 |
顯示位數(shù) | 5位讀數(shù)分辨率 |
測量功能 | |
測量參數(shù) | Cs, Cp, Rs (ESR), Rp, Z,D (tanδ) |
基本精度 | 0.1% |
測量速度 | 快速: 15 次/秒,中速: 5次/秒,慢速: 2次/秒 |
等效電路 | 串聯(lián),并聯(lián) |
量程方式 | 自動,手動 |
觸發(fā)方式 | 內(nèi)部,手動,外部 |
校正功能 | 開路 / 短路清零 |
測量端 | 四線制(2個檢測端和2個驅(qū)動端),5端 |
顯示方式 | 直讀,絕對偏差∆ABS、相對偏差∆%和分選結(jié)果 |
測試信號 | |
測試頻率 | 100Hz,120Hz,1kHz,10kHz, |
測試電平 | 0.1 Vrms, 0.3 Vrms和1 Vrms |
輸出阻抗 | 30Ω,100Ω |
測量顯示范圍 | |
Cs, Cp | 0.01pF -99999μF |
Rs , Rp, Z | 0.00001Ω -99.999MΩ |
D (tanδ) | 0.00001 -9.99999 |
Δ% | -999.999% -999.999% |
分選和接口 | |
分選功能 | 內(nèi)建比較器:四檔:(三檔合格,一檔不合格),另有一個附屬檔 |
訊響 | OFF,IN,HI,LO |
極值設(shè)定方式 | 百分比輸入上下限+標(biāo)稱值 |
接口配置 | RS-232C接口/HANDLER/USB Device/GPIB(選件) |
一般規(guī)格 | |
操作環(huán)境 | 0°C -40°C ,≤90%RH |
電源要求 | 198V -242V(AC),47.5Hz -63Hz |
功耗 | ≤30 VA |
尺寸 | 335 mm(寬) x 120 mm(高) x 320 mm(深) |
重量 | 2.5kg |
標(biāo)配附件
• AC電源線
• 用戶手冊
• 測試報告
• 保修卡和合格證
• 通訊線纜
• HPS28001 四端開爾文夾測試線
選配附件
• HPS28003 SMD貼片元件測試鉗
• HPS28004 SMD貼片專用測試夾具
• USB轉(zhuǎn)RS232通用串口線(1.8米)
• 軟件光盤(上位機(jī)數(shù)據(jù)采集軟件)
技術(shù)服務(wù)
l 我們有專業(yè)的工程師,可為所要測試的產(chǎn)品設(shè)計測試方式和測試治具,調(diào)試好測試儀器的各項參數(shù)使其達(dá)到最優(yōu)性能。
l 免費(fèi)提供技術(shù)培訓(xùn),免費(fèi)提供儀器保養(yǎng)維護(hù)技術(shù)。
l 可根據(jù)客戶一對一的要求設(shè)計制作專用的測試方案及測試治具。