PCR Detection Kit for Mycoplasma Contamination
貨號(hào) | 規(guī)格 |
Myco-P-20 | 20次反應(yīng) |
Myco-P-50 | 50次反應(yīng) |
Myco-P-100 | 100次反應(yīng) |
支原體污染PCR檢測(cè)試劑盒,用于檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染,可檢測(cè)屬于柔膜菌綱(Mollicutes)的支原體、脲原體、無(wú)膽甾支原體、螺原體、蟲原體、中間原體等超過(guò)百種,與柔膜菌綱以外的其他微生物沒有特異性反應(yīng)。
支原體是種直徑約為0.1-0.3 μm、無(wú)細(xì)胞壁的原核生物,具有變形能力,屬于柔膜菌綱,常被用作柔膜菌綱的統(tǒng)稱。支原體是小的具有完整細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物,可透過(guò)常見過(guò)濾膜(0.22-0.45 μm),因此常規(guī)的無(wú)菌過(guò)濾方法不能將其去除,靶向細(xì)胞壁的抗生素也對(duì)支原體無(wú)效。支原體種類繁多,通常為寄生性或腐生性,有些種類可作為正常共生菌存在,有些種類具有致病性,還有些種類具有細(xì)胞侵入性。
支原體污染是基礎(chǔ)研究和工業(yè)生產(chǎn)中個(gè)很常見的問(wèn)題,據(jù)報(bào)導(dǎo),有5-35%的細(xì)胞株受到污染;些實(shí)驗(yàn)室由于對(duì)此不夠重視,實(shí)際上可能有高達(dá)80%以上的細(xì)胞株發(fā)生支原體污染。支原體在光學(xué)顯微鏡下不可見,對(duì)培養(yǎng)基的需求有限,般不會(huì)引起培養(yǎng)物混濁,因此細(xì)胞被支原體污染般難以察覺。支原體污染能消耗營(yíng)養(yǎng)物,促進(jìn)代謝積累,導(dǎo)致pH改變,誘導(dǎo)或抑制細(xì)胞因子表達(dá),并改變培養(yǎng)細(xì)胞的代謝、增殖特征及形態(tài)。由于支原體污染能影響幾乎每個(gè)細(xì)胞參數(shù),所以很多研究都強(qiáng)調(diào)常規(guī)檢測(cè)正在培養(yǎng)的細(xì)胞,以確保觀察到的結(jié)果不被支原體污染所損害。
目已知的支原體種類約200種,污染細(xì)胞培養(yǎng)物的支原體種類有20多種。其中95%的污染是由五種支原體引起:精氨酸支原體(Mycoplasma arginini),發(fā)酵支原體(Mycoplasma fermentans),豬鼻支原體(Mycoplasma hyorhinis),口腔支原體(Mycoplasma orale)和萊氏無(wú)膽甾原體(Acholeplasma laidlawii)。精氨酸支原體和萊氏無(wú)膽甾原體為牛源性,主要由牛血清帶入;豬鼻支原體主要由胰酶(通常來(lái)源于豬)帶入;發(fā)酵支原體和口腔支原體為人源性,主要由實(shí)驗(yàn)操作人員帶入,人源性的支原體污染還包括唾液支原體和人型支原體。原代細(xì)胞的支原體污染占比不到1%,但是種類多,已知有17種支原體,主要為鼠、禽和犬來(lái)源的支原體,如雞毒支原體(Mycoplasma gallisepticum)、關(guān)節(jié)炎支原體(Mycoplasma arthritidis)、肺支原體(Mycoplasma pulmonis)、犬支原體(Mycoplasma canis)等,般是從原始的動(dòng)物組織中帶入進(jìn)來(lái),因此種類比較多,并且有不確定性。歐洲藥典(EUROPEAN PHARMACOPOEIA)2.6.7指定了六種需檢測(cè)的支原體:萊氏無(wú)膽甾原體,雞毒支原體,豬鼻支原體,口腔支原體,肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae)和滑液支原體(Mycoplasma synoviae)。由上述內(nèi)容可知,引起細(xì)胞污染的支原體種類較為繁雜,并且可能存在未知種類,因此使用支原體通用性PCR引物更適合檢測(cè)支原體污染的需要,可以避免使用物種特異性引物可能導(dǎo)致的漏檢情況。
目美國(guó)、歐洲、日本的藥典仍然推薦體外培養(yǎng)法作為檢測(cè)支原體污染的金標(biāo)準(zhǔn)。培養(yǎng)法通過(guò)使用選擇性培養(yǎng)基,可以達(dá)到很強(qiáng)的特異性,并且有很高的靈敏度,但是其缺點(diǎn)在于操作比較繁瑣,且耗時(shí)較長(zhǎng),完成個(gè)完整的檢測(cè)需28天之久。對(duì)于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)而言,這是個(gè)不可承受的時(shí)間成本。PCR檢測(cè)由于其特異性強(qiáng)、靈敏度高,且快速的特點(diǎn),成為培養(yǎng)法的良好替代方案,正逐漸被各國(guó)所接受。
本試劑盒采用支原體通用性引物,可檢測(cè)上述提及的全部支原體,低檢測(cè)限(LOD,100%檢出時(shí)的低模板濃度)為反應(yīng)液中10個(gè)支原體基因組,能在2到3小時(shí)內(nèi)獲得可靠的結(jié)果,是種靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速的檢測(cè)支原體污染的方法,具有以下特點(diǎn): ①特異性引物是針對(duì)高度保守的支原體16S rRNA序列設(shè)計(jì)的,可用于檢測(cè)非常廣泛的支原體種類,不受真核細(xì)胞或細(xì)菌DNA干擾。經(jīng)本試劑盒測(cè)試的支原體菌株涵蓋了所有常見的支原體污染種類; ②靈敏度高,低檢測(cè)限僅需10個(gè)拷貝的支原體基因組; ③陽(yáng)性對(duì)照所用引物與支原體檢測(cè)相同,可幫助判斷假陰性現(xiàn)象,避免假陰性導(dǎo)致的誤判; ④包含PCR反應(yīng)所需的所有成分,只需進(jìn)行次PCR反應(yīng),降低了交叉污染的幾率,使用方便。
由于支原體污染比較隱蔽,所以建議給細(xì)胞定期做支原體檢測(cè),以免在未察覺的情況下給您的實(shí)驗(yàn)造成影響?晒﹨⒖嫉淖龇ㄊ牵涸谛录(xì)胞進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí),以及細(xì)胞凍存入庫(kù),都應(yīng)該做下支原體檢測(cè),平時(shí)每三個(gè)月常規(guī)檢測(cè)次。
如發(fā)現(xiàn)支原體污染,可用我公司的支原體清除劑進(jìn)行清除。支原體清除劑采用雙重殺菌機(jī)制,不易耐藥。
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用。
我司可提供數(shù)十種支原體的種類鑒定和檢測(cè),詳情請(qǐng)咨詢客服QQ54333592,或訪問(wèn)公司官網(wǎng)。
支原體名稱 | 主要宿主 | 支原體名稱 | 主要宿主 |
支原體污染 | 細(xì)胞培養(yǎng)物 | 豬肺炎支原體 | 豬 |
豬鼻支原體 | 豬 | ||
雞毒支原體 | 雞 | 豬滑液支原體 | 豬 |
滑液支原體 | 雞 | 絮狀支原體 | 豬 |
衣阿華支原體 | 鳥類 | 豬支原體 | 豬 |
火雞支原體 | 火雞 | 羊附紅細(xì)胞體 | 羊 |
關(guān)節(jié)炎支原體 | 鼠 | 無(wú)乳支原體 | 羊 |
肺支原體 | 鼠 | 山羊支原體山羊肺炎亞種 | 羊 |
生殖支原體 | 人 | 結(jié)膜支原體 | 羊 |
人形支原體 | 人 | 綿羊肺炎支原體 | 羊 |
穿透支原體 | 人 | 腐敗支原體 | 羊 |
肺炎支原體 | 人 | 絲狀支原體屬(通用) | 羊,牛 |
唾液支原體 | 人 | 萊氏無(wú)膽甾支原體 | 羊,牛 |
人類脲原體 | 人 | 絲狀支原體絲狀亞種 | 牛 |
解脲脲原體 | 人 | Mycolasma leachii | 牛 |
微小脲原體 | 人 | 維容氏支原體 | 牛 |
犬支原體 | 犬 | 牛生殖道支原體 | 牛 |
愛德華支原體 | 犬 | 差異脲原體 | 牛 |
貓血支原體 | 貓 | 牛支原體 | 牛 |
Candidatus Mycoplasma haemominutum | 貓 | 嗜血支原體通用 | 各種哺乳動(dòng)物血液 |
相關(guān)產(chǎn)品:
支原體污染PCR檢測(cè)試劑盒,貨號(hào): Myco-P-20,Myco-P-50,Myco-P-100
染料法支原體污染實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒,貨號(hào): Myco-qs-20,Myco-qs-50,Myco-qs-100
探針法支原體污染實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒,貨號(hào): Myco-qt-20,Myco-qt-50,Myco-qt-100
支原體清除劑,貨號(hào):Myco-E-h,Myco-E-1,Myco-E-5
產(chǎn)品名稱 | 人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 |
規(guī)格 | 48T/96T |
貨期 | 3-5天 |
Anti-ER/PR/c-erbB-2 Kit,ER/PR/c-erbB-2檢測(cè)試劑盒上海藍(lán)源生物科技有限公司提供各種一抗,二抗,單克隆,多克隆抗體以及不同蛋白的各種標(biāo)記服務(wù)、各種純化服務(wù)及載體蛋白連接服務(wù),提供抗體、抗原親和層析柱裝配服務(wù)。產(chǎn)品規(guī)格:0.1ml,0.2mlAnti-ER/PR/c-erbB-2 Kit,ER/PR/c-erbB-2檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品編號(hào),名稱及相關(guān)產(chǎn)品如下表:
LY-1852R | Anti-MKP-2/DUSP4,絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗體 |
LY-0122R | Anti-ER-alpha,雌激素受體α抗體 |
LYm-1591M | Anti-ER/PR/c-erbB-2 Kit(mo monoclonal),ER/PR/c-erbB-2檢測(cè)試劑盒(鼠單抗) |
LY-0894R | Anti-Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167),磷酸化雌激素受體ER alpha 抗體 |
LY-1643R | Anti-Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537),磷酸化雌激素受體α抗體 |
LY-3130R | Anti-Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118),磷酸化雌激素受體α抗體 |
LY-3131R | Anti-Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106),磷酸化雌激素受體α抗體 |
LY-0254R | Anti-ER-Alpha,雌激素受體α抗體(用于western blot) |
LY-2098R | Anti-ER-Alpha,雌激素受體α抗體 |
LY-0174R | Anti-ER-alpha/beta,雌激素受體α/β抗體 |
LY-0116R | Anti-ER-beta,雌激素受體β 抗體 |
LY-0255R | Anti-ER-Beta,雌激素受體β抗體 |
LY-0593R | Anti-EpCAM/CD326,上皮特異性抗原抗體 |
LY-0188R | Anti-ET-1,內(nèi)皮素-1抗體 |
LY-0202R | Anti-ET-1,內(nèi)皮素-1抗體 |
LY-0954R | Anti-ET-1,內(nèi)皮素-1抗體 |
LYm-0954M | Anti-ET-1,內(nèi)皮素-1單克隆抗體 |
LY-0954Rs | Anti-ET-1(whole serum),內(nèi)皮素-1抗體(抗血清) |
LY-1285R | Anti-Ets1/ETS-1,Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體 |
LY-2765R | Anti-ETK/BMX,非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體 |
LY-3132R | Anti-Phospho-ETK (Tyr40),磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體 |
LY-0613R | Anti-Eukaryotic aspartyl protease(Rice),天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體(水稻蛋白的一種) |
LY-0852R | Anti-EV71 VP1,腸道病毒71型/手足口病病毒抗體 |
LY-0983R | Anti-EV71 VP1 (CT),腸道病毒71型/手足口病病毒抗體(C端) |
LY-0243R | Anti-EXPB-2,植物延展素-β |
LY-2221R | Anti-ATEXPA10,植物延長(zhǎng)蛋白(擬南芥) |
LY-1343R | Anti-Ezrin/Radixin,埃茲蛋白抗體 |
LY-3133R | Anti-Phospho-Ezrin (Tyr353),磷酸化埃茲蛋白抗體 |
LY-3134R | Anti-Phospho-Ezrin (Thr567),磷酸化埃茲蛋白抗體 |
LY-0949R | Anti-F1 operon positive regulatory protein(NT),肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端) |
LY-0950R | Anti-F1 operon positive regulatory protein(CT),肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端) |
LY-0788R | Anti-intestinal FABP/IFABP,腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 |
LY-0386R | Anti-FABP(brain) CT,腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體(C端) |
LY-2135R | Anti-FABPB,腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 |
LY-1040R | Anti-factor V,凝血因子5抗體 |
LY-0332R | Anti-factor VIII(FVIII) human,第八因子相關(guān)抗原抗體 |
LY-0434R | Anti-factor VIII(FVIII),第八因子相關(guān)抗原抗體 |
LY-1587R | Anti-factor XIII,凝血因子13抗體 |
LY-0511R | Anti-FADD,Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白 |
LY-1349R | Anti-phospho-FADD(Ser194),磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體 |
LY-1340R | Anti-FAK,粘著斑激酶抗體 |
LY-3159R | Anti-Phospho-FAK (Tyr397),磷酸化粘著斑激酶抗體 |
LY-3160R | Anti-Phospho-FAK (Tyr861),磷酸化粘著斑激酶抗體 |
LY-3162R | Anti-Phospho-FAK (Tyr576/577),磷酸化粘著斑激酶抗體 |
LY-3163R | Anti-Phospho-FAK (Tyr925),磷酸化粘著斑激酶抗體 |
LY-3164R | Anti-Phospho-FAK (Tyr407),磷酸化粘著斑激酶抗體 |
LY-1639R | Anti-phospho-FAK (Tyr577),磷酸化粘著斑激酶抗體 |
LY-1348R | Anti-FAF1,Fas相關(guān)1因子抗體 |
人H1N1 抗體(IgG)檢測(cè)試劑盒 |
人H1N1 抗體(IgM)檢測(cè)試劑盒 |
三聚氰胺ELISA快速檢測(cè)試劑盒 |
人分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5) ELISA試劑盒 |
人C1q/TNF相關(guān)蛋白3(Cartonectin/CTRP3/CORS-26)ELISA試劑盒 |
豬主要急性期蛋白( MAP)ELISA試劑盒 |
豬結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒 |
人CD5分子樣蛋白(CD5L)ELISA試劑盒 |
人層粘連蛋白-5(LN-5)ELISA試劑盒 |
大鼠降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒 |
人白介素22(IL-22)ELISA試劑盒 |
人活性氧(ROS)ELISA試劑盒 |
大鼠環(huán)加氧酶1(COX-1)ELISA試劑盒 |
人酒石酸鹽抵抗的酸性磷酸酶(TRAP)ELISA試劑盒 |
大鼠瓜氨酸ELISA試劑盒 |
人血栓素A2合成酶(TX-A2)ELISA試劑盒 |
小鼠4-羥基壬烯酸(HNE)ELISA試劑盒 |
小鼠3-硝基酪氨酸ELISA試劑盒 |
小鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)ELISA試劑盒 |
志賀氏菌屬熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品編號(hào): DL010
檢測(cè)原理:
試劑盒中含有志賀氏菌特異的引物,當(dāng)樣品中含有志賀氏菌時(shí),前增菌后提取的志賀氏菌DNA通過(guò)PCR成指數(shù)擴(kuò)增,在反應(yīng)過(guò)程中志賀氏菌特異的熒光探針跟靶核酸雜交, 同時(shí)被Taq酶水解, 把探針上的熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)分開, 從而通過(guò)熒光增量來(lái)實(shí)時(shí)判斷志賀氏菌的存在。
規(guī)格: 48份/盒
產(chǎn)品盒組成:
組成成份(48T/kit) 規(guī) 格 數(shù) 量DNA提取液 5 ml 1管志賀氏菌PCR反應(yīng)液 1150 ul 1管Taq酶(5U/ul) 20ul 1管志賀氏菌陽(yáng)性對(duì)照 0.5 ml 1管志賀氏菌陰性對(duì)照 0.5 ml 1管
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):
本試劑盒靈敏度為100拷貝/ml。定量檢測(cè)線性范圍為:10-1010拷貝/ml。陰性對(duì)照無(wú)Ct值顯示或Ct值為40,陽(yáng)性對(duì)照的Ct值≤30,否則為實(shí)驗(yàn)失敗。
適用儀器:
ABI7500,9600系列,MJ opticon2,Bio-Rad等熒光定量PCR儀均可。
注意事項(xiàng):本試劑盒僅用于體外檢測(cè)和研究用途,開始使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書全文。實(shí)驗(yàn)必須嚴(yán)格分區(qū)操作:PCR前準(zhǔn)備區(qū)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)試劑;樣本處理區(qū)進(jìn)行待測(cè)樣本、模板處理;檢測(cè)區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增、檢測(cè)。有關(guān)實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范請(qǐng)參照國(guó)家相關(guān)部門頒布的基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的管理規(guī)范執(zhí)行。
***************************************************************** 三 方 圓 產(chǎn) 品 列 表
類 別 貨 號(hào) 產(chǎn) 品 名 稱 規(guī) 格
膠體金系列 KS001 鹽酸克倫特羅快速檢測(cè)試紙條 40條/盒膠體金系列 KS002 孔雀石綠快速檢測(cè)試紙條 20條/盒 酶聯(lián)免疫系列 ML001 克倫特羅酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒 96孔/盒酶聯(lián)免疫系列 ML002 萊克多巴胺酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒 96孔/盒酶聯(lián)免疫系列 ML003 孔雀石綠酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒 96孔/盒 熒光PCR系列 DL001 坂歧腸桿菌熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL002 副溶血弧菌熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL003 產(chǎn)毒副溶血弧菌熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL004 熒光定量PCR分型檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL005 熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL006 單增李斯特氏菌熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL007 大腸埃希菌O157:H7熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL008 禽流感H5/H7/H9多重?zé)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL009 沙門氏菌屬熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL010 志賀氏菌屬熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL011 禽流感病毒通用熒光定量RT-PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL012 禽流感H5亞型單重?zé)晒舛縍T-PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL013 禽流感H7亞型單重?zé)晒舛縍T-PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL014 禽流感H9亞型單重?zé)晒舛縍T-PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL015 新城疫病毒熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒熒光PCR系列 DL016 諾沃克熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 48份/盒
生產(chǎn)商:深圳市三方圓生物科技有限公司 聯(lián)系人:戴 先生 13428956869 0755-81804321 27948010(T) 27697378(F) QQ: 366656869 Email: dailincai@163.com http://www.triphil.com 我們用心做到,同樣的品質(zhì),不一樣的價(jià)格,歡迎來(lái)電咨詢! 世界品質(zhì),中國(guó)制造,支持民族品牌。 *****************************************************************更多信息:http://www.triphil.com
適用
北京普華仁生物技術(shù)開發(fā)有限公司()提供的微囊藻毒素檢測(cè)試劑盒適用于水中微囊藻毒素的定量檢測(cè)。
檢測(cè)原理
微囊藻毒素檢測(cè)試劑盒由可以和微囊藻毒素及微囊藻毒素酶標(biāo)記物結(jié)合的多克隆抗體制成。樣品中的微囊藻毒素與微囊藻毒素酶標(biāo)記物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合數(shù)量有限的抗體結(jié)點(diǎn)。
檢測(cè)過(guò)程中, 先加入微囊改造毒素酶標(biāo)記物及含有微囊藻毒素的樣品到測(cè)試孔中接著加入抗體,酶標(biāo)記物與樣品中的微囊藻毒素競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合同樣的抗體的結(jié)合點(diǎn)。測(cè)試孔中包被有抗兔IgG,用于捕獲加入的兔抗微囊藻毒素抗體。
孵育30分鐘后洗掉小孔中所有沒有結(jié)合的分子。每孔中加入干凈的底物溶液,連接的酶結(jié)合物可以將底物轉(zhuǎn)化成藍(lán)色化合物,一個(gè)酶分子可以轉(zhuǎn)化多個(gè)底物分子。
由于各個(gè)孔中抗體可結(jié)合位點(diǎn)是相同的,并且加入的微囊藻毒素酶標(biāo)記物的量也是相同的,樣品中微囊藻毒素含量低的則酶標(biāo)記物結(jié)合得多,顏色會(huì)顯深藍(lán)色。反之,樣品中微囊藻毒素含量高的則酶標(biāo)記物結(jié)合得少,顏色會(huì)顯淺藍(lán)色。
注意:顏色與微囊藻毒素的含量成反比。
較深的顏色=較低的濃度
較淺的顏色=較高的濃度
特性:
特異性
Beacon微囊藻毒素檢測(cè)試劑盒沒有區(qū)分微囊藻毒素-LR(作為標(biāo)準(zhǔn)品)及其它類型,然而可以測(cè)到微囊藻毒素的其它類型,以下表格中展示的是相關(guān)值及交叉反映率(%CR),以下所有濃度均為ppb級(jí)。
種類 | %CR |
微囊藻毒素-LR | 100 |
微囊藻毒素-RR | 87 |
微囊藻毒素-YR | 48 |
節(jié)球藻毒素 | 31 |
試劑盒組成
· 包被有羊抗兔抗體的的微孔板 (12×8條)。
· 陰性對(duì)照品一瓶(0ppb微囊藻毒素-LR)。
· 0.1ppb、0.3ppb、0.8ppb、2ppb微囊藻毒素-LR標(biāo)準(zhǔn)品各一瓶。
· 1.0ppb微囊藻毒素質(zhì)控樣品一瓶。
· 微囊藻毒素HRP酶標(biāo)記物一瓶。
· 兔抗微囊藻毒素抗體溶液一瓶。
· 底物一瓶。
· 停止液一瓶。(注意!1N 鹽酸,小心處理)
· 100×清洗液。
注意事項(xiàng)
1. 不用時(shí)請(qǐng)將試劑盒儲(chǔ)存于4-8℃。
2. 不可冷凍試劑盒,不可使其暴露在大于37℃環(huán)境中。
3. 開始實(shí)驗(yàn)前,所有試劑達(dá)到室溫。
4. 不可使用過(guò)期試劑。
5. 不同批次的試劑不可混用。
6. 使用確證方法確認(rèn)陽(yáng)性樣品。
需要的試劑和材料
1. 酶標(biāo)儀
2. 薄膜
3. 計(jì)時(shí)器或表
4. 蒸餾水或去離子水
5. 振蕩器
檢測(cè)程序
1. 將所有試劑及樣品置于室溫下。
2. 從鋁箔袋中拿出要求數(shù)量的微孔條,放入干燥劑并重新封好袋子以免微孔條受潮。
3. 稀釋100倍濃縮清洗液為1倍清洗液,例:取5ml 100倍清洗液到500ml洗瓶中并加入495ml蒸餾水。
4. 吸取50ul酶標(biāo)記物到微孔板的每個(gè)孔中。
5. 吸取50ul標(biāo)準(zhǔn),陰性對(duì)照,樣品到對(duì)應(yīng)微孔中,必須保證每種溶液使用干凈的吸頭吸取,避免交叉污染。
6. 加入50ul抗體溶液到每個(gè)小孔中。
7. 快速震蕩使孔中的溶液混合,并敷上薄膜,或者微孔板可以放在振蕩器上震蕩孵育,從而達(dá)到在孵育期間持續(xù)震蕩的效果。
8. 孵育30分鐘。
9. 孵育完后,去掉封口膜將微孔中的溶液倒入水槽中,用1倍清洗液清洗完全充滿微孔,震蕩后倒掉,重復(fù)四次,總共五次洗板。在吸水紙上拍打,盡可能將水拍干。
10. 每個(gè)微孔中加入100ul底物溶液。
11. 蓋上小孔并孵育30分鐘。
12. 按照加底物的順序每孔中加入100ul停止液。停止液為1 N鹽酸,需小心操作。
13. 450nm下讀板,如果酶標(biāo)儀有雙波長(zhǎng),可同時(shí)測(cè)605或650nm雙波長(zhǎng)。
14. 如果酶標(biāo)儀可以處理數(shù)據(jù),可用半對(duì)數(shù)線性或4參數(shù)曲線擬合,如果為手動(dòng)計(jì)算,則可按照以下部分進(jìn)行。
計(jì)算結(jié)果
1. 讀板之后,求標(biāo)準(zhǔn),陰性對(duì)照,樣品的平均吸光度值并按以下方法計(jì)算%B0:
標(biāo)準(zhǔn),陰性對(duì)照,樣品吸光度值的平均值
%B0 = --------------------------------------------------------
陰性對(duì)照的平均吸光值
2. 以%B0為Y軸,以微囊藻毒素標(biāo)準(zhǔn)濃度的半對(duì)數(shù)值為X軸,繪制曲線。
3. 通過(guò)每個(gè)樣品的B0%,在圖上計(jì)算出微囊藻毒素的濃度。
4. 如果樣品B0%在設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)B0%范圍之內(nèi),就可以得出一個(gè)具體的濃度值。如果樣品B0%出了范圍只能說(shuō)明樣品的濃度大于高濃度的標(biāo)準(zhǔn)或低于低濃度的標(biāo)準(zhǔn)。
質(zhì)量控制
1. 1.0ppb質(zhì)控樣的%B0值應(yīng)該處于下面的范圍之內(nèi):
1.0 ppb Microcystin control 0.80-1.30ppb
2. 樣品計(jì)算
物質(zhì) | 吸光度值 | 平均吸光度值 ±SD** | %RSD | %B0 | 濃度(ppb) |
陰性對(duì)照 | 1.478 1.552 | 1.515±0.052 | 3.4 | 100 | N/A |
0.1 | 1.255 1.194 | 1.225±0.043 | 3.5 | 80.8 | N/A |
0.3 | 0.941 0.932 | 0.937±0.006 | 0.68 | 61.8 | N/A |
0.8 | 0.626 0.602 | 0.614±0.017 | 2.7 | 40.5 | N/A |
2.0 | 0.389 0.386 | 0.302±0.008 | 0.54 | 25.6 | N/A |
樣品 | 0.610 0.634 | 0.622±0.017 | 2.7 | 31.5 | 0.909 |
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甲醛快速檢測(cè)試劑-適用范圍
甲醛快速檢測(cè)試劑廣泛用于檢測(cè)食品中的甲醛(福爾馬林):1)水產(chǎn)品及其加工制品,如各種魚類、蝦蟹、海蠣、魚丸、蝦仁、魷魚干和其他各種水產(chǎn)加工制品; 2)各種蔬菜等食品.
甲醛快速檢測(cè)試劑-檢測(cè)原理
違法添加于食品中的甲醛(福爾馬林)能與本試劑反應(yīng)生成紫色的產(chǎn)物,紫色的深淺與樣品中甲醛的殘留量成正比。因此,水產(chǎn)品、水發(fā)食品的樣品液加入本試劑,反應(yīng)后若呈現(xiàn)明顯的紫色,表明此樣品可能浸泡過(guò)福爾馬林,建議用乙酰丙酮等方法做進(jìn)一步定量實(shí)驗(yàn)。蛋白質(zhì)、脂肪、氨基酸、糖類、乙醛、丙醛、甲醇、乙醇、硫酸鹽、亞硫酸(氫)鹽及二氧化硫等食品中成分或結(jié)構(gòu)類似物對(duì)本測(cè)定方法無(wú)干擾。
甲醛快速檢測(cè)試劑-使用方法
1、水產(chǎn)品和水發(fā)食品以及各類液態(tài)食品:一般現(xiàn)場(chǎng)的水產(chǎn)品及水發(fā)食品均有滲出液或浸泡液,可直接取樣試驗(yàn)。試驗(yàn)方法:先往“多孔比色管”的孔中滴加1滴檢測(cè)液A,1滴檢測(cè)液B,隨后. 用0.5ml 吸管吸取樣品滲出液或浸泡液0.5ml (約10滴)加到該孔中,搖動(dòng)混勻(采用攪拌混勻),混合均勻后約過(guò)1分鐘再加入1滴檢測(cè)液C,觀察顏色變化,參考色卡進(jìn)行結(jié)果判斷。2、其他食品:取少量待測(cè)樣品于10ml燒杯中(約l/3杯),稍微剪碎,再加入等量的干凈自來(lái)水,浸泡10—20分鐘,其間攪拌數(shù)次。然后用0.5ml 吸管吸取此浸泡液0.5ml (約10滴)試驗(yàn),試驗(yàn)方法如上所述。
甲醛快速檢測(cè)試劑-結(jié)果判斷
結(jié)果判斷:若反應(yīng)結(jié)果溶液無(wú)色或顯黃色,表明樣品未受甲醛(福爾馬林)污染,若反應(yīng)結(jié)果溶液呈明顯的紫色,表示被檢樣品浸泡過(guò)甲醛(福爾馬林),其顏色越深表示含量越高;若呈很淡的紫色,建議視為無(wú)人為添加甲醛(福爾馬林);或延長(zhǎng)樣品提取和反應(yīng)時(shí)間,再次實(shí)驗(yàn)。
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