【規(guī)格】48T/96T
【所需標(biāo)本】血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等.
【庫存狀態(tài)】現(xiàn)貨供應(yīng),訂單生成,立即安排發(fā)貨。
【使用范圍】僅供科研使用,不得用于臨床。
【產(chǎn)品用途】用于測定人血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。
上海潤裕生物-中國老牌ELISA試劑盒供應(yīng)商,免費代測,從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。
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人白介素10(IL-10) elisa試劑盒廠家組成:
試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
說明書 1份 1份
封板膜 2片(48) 2片(96)
密封袋 1個 1個
酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
鏈霉親和素-HRP 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
生物素標(biāo)記抗體 0.5ml×1瓶 1 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
人白介素10(IL-10) elisa試劑盒廠家樣品收集、處理及保存方法:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人白介素10(IL-10) elisa試劑盒廠家我司ELISA試劑盒采用原裝進(jìn)口抗體,高品質(zhì)Elisa試劑盒,專業(yè)的Elisa試劑盒廠家,品質(zhì)保證,免費代測。其他相關(guān)產(chǎn)品歡迎選購:
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ELISA試劑盒注意事項:1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6. 底物請避光保存。7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9. 本試劑不同批號組分不得混用。10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的待測物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物質(zhì)濃度。 二、JEB-12260小鼠白介素10(IL-10)Elisa試劑盒性能特點:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%.三、檢測范圍和保存條件及有效期 1.試劑盒保存:2-8℃;2.有效期:6個月。四、計算 以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 五、操作注意事項:1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6)洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8)實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。9)不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。10)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。11)按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。 JEB-12260小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒檢測范圍:1ng/L -30ng/L 六、小問題回答問:那我們算出來的ACH含量為什么出現(xiàn)負(fù)值?答:說明個別樣本的濃度很低,當(dāng)濃度接近第6個點的時候 直線方程就有可能計算出負(fù)值問:一個孔需要多少量的血清?答:一個孔上樣量10-50微升。 其他相關(guān)產(chǎn)品:JEB-10431 人抗磷壁酸抗體(TA)ELISA試劑盒
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JEB-12260 小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒說明書七、公司介紹:南京金益柏生物科技有限公司是一家專業(yè)從事自主產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)、技術(shù)服務(wù)、知名品牌代理的高新技術(shù)生物公司。為生命科學(xué)工作者提供全方位高水平產(chǎn)品及技術(shù)服務(wù),有別于眾多國內(nèi)企業(yè)單純代理貿(mào)易的簡單運營模式,強調(diào)高端技術(shù)的掌握和優(yōu)化、自主產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn),強調(diào)良好售后服務(wù)和技術(shù)支持,打造中國乃至全球知名品牌。 公司擁有高水平技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊,建立多種技術(shù)平臺,產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、藥學(xué)等領(lǐng)域。
八、產(chǎn)品相冊:
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測方法: ELISA酶聯(lián)免疫法
說 明 書:隨貨發(fā)送,也可直接聯(lián)系在線銷售索取
測試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
試劑盒保存及有效期:2-8℃,避光保存:6個月。
產(chǎn)品產(chǎn)地:進(jìn)口/國產(chǎn)
產(chǎn)品庫存:
品牌:自主研發(fā)/進(jìn)口原裝
產(chǎn)品價格:價格優(yōu)惠,歡迎來電洽談!
試劑盒使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.
產(chǎn)品價格:價格優(yōu)惠,歡迎來電洽談!
ELISA試劑盒定性定量檢測一步到位,可同時大批量完成多種屬的檢測工作,而且一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,正規(guī)專業(yè)的我們,一定能幫您,將實驗做得更好,更精確。試驗過程中,如有任何疑問都可和我們聯(lián)系,無論是售前、售中、售后我們都將始終如一,將優(yōu)質(zhì)服務(wù)進(jìn)行到底。
本試劑盒僅供研究使用。
使用目的:
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿、或相關(guān)組織液中乳酸脫氫酶(LDH)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用間接法測定標(biāo)本中大鼠乳酸脫氫酶(LDH)水平。用純化的大鼠乳酸脫氫酶(LDH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的乳酸脫氫酶(LDH)標(biāo)準(zhǔn)品和未知濃度的乳酸脫氫酶(LDH)待檢樣品,溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗IgG抗體,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乳酸脫氫酶(LDH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠乳酸脫氫酶(LDH)濃度。
試劑盒組成
1 | 20倍濃縮洗滌液 | 50ml×1瓶 |
9 | 標(biāo)準(zhǔn)品S1(6 IU/L) | 0.5ml×1瓶 |
2 | 鏈霉親和素-HRP | 6ml×1瓶 | 標(biāo)準(zhǔn)品S2(4 IU/L) | 0.5ml×1瓶 | |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 標(biāo)準(zhǔn)品S3(2 IU/L) | 0.5ml×1瓶 | |
4 | 生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體 | 6ml×1瓶 | 標(biāo)準(zhǔn)品S4(1IU/L) | 0.5ml×1瓶 | |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 標(biāo)準(zhǔn)品S5(0.5 IU/L) | 0.5ml×1瓶 | |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 10 | 密封袋 | 1個 |
7 | 終止液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 3張 |
8 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 12 | 說明書 | 1份 |
標(biāo)本要求
1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
操作步驟
1. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣品孔。然后在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl,在樣本反應(yīng)孔中先加入待測樣品10μl再加入樣品稀釋液40μl(樣品最終稀釋度為5倍),蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)4次,拍干。
5. 加生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體:每孔加入生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體50μl。37℃溫育30分鐘
6. 洗滌:操作同4。
7. 加鏈霉親和素-HRP:每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
8. 洗滌:操作同4。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值待入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
檢測范圍:0.312 mU/ml-20 mU/ml
靈敏度:0.078 mU/ml
規(guī)格:
96人份/盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
關(guān)于ELISA試劑盒
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。
Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
HBsAg試劑特點(檢測模式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點的鼠復(fù)合單位,可測得HBsAg變異樣品,提高檢測的特異性(99.98%)提高檢測的靈敏度,應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說(PEI)HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品,對ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml對ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml
ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會與第一次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。
LISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。
特點:一、高效、靈敏、特異的抗體; 二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體; 四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型; 五、節(jié)省實驗經(jīng)費。
elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關(guān)系,說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機(jī)氯含量測定,樣品水中含有無機(jī)氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機(jī)氯為2.98mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
5. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9. 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
10. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
11. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
12. 按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
elisa試劑盒測試要求
做好對照
正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
實驗條件的選擇
在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。
試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。
檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實驗結(jié)果的重復(fù)性
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大
上海繁旌科技更多優(yōu)勢產(chǎn)品供應(yīng)
綿羊雄甾烯酮(ADT)ELISA試劑盒
Mouse Epiregulin,EPR ELISA Kit小鼠表皮調(diào)節(jié)素(EPR)ELISA試劑盒96T/48T
Human Complement fragment 3b,C3b ELISA Kit人補體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒96T/48T
Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4,TIMP-4 ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒96T/48T
綿羊生長激素(GH)ELISA試劑盒
Mouse ID ELISA kit小鼠脫碘酶(ID)ELISA試劑盒96T/48T
Human Complement fragment 4b,C4b ELISA Kit人補體片斷4b(C4b)ELISA試劑盒96T/48T
Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3,TIMP-3 ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒96T/48T
Monkey Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 猴白介素4(IL-4)ELISA試劑盒96T/48T
Mouse keratinocyte autocrine factor,KAF ELISA kit小鼠角化細(xì)胞分泌因子ELISA試劑盒96T/48T
Human Complement fragment 5b,C5b ELISA Kit人補體片斷5b(C5b)ELISA試劑盒96T/48T
Human Oncostatin-M,OSM ELISA KIT 人抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒96T/48T
Monkey Interleukin 2,IL-2 ELISA kit猴白介素2(IL-2)ELISA試劑盒96T/48T
Mouse Glutathione peroxidase,GSH-Px ELISA kit小鼠谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-PX)ELISA試劑盒96T/48T
Human immunoglobulin heavy chain,IgH ELISA Kit人免疫球蛋白重鏈(IgH)ELISA試劑盒96T/48T
Human Pulmonary surfatcant-associated protein D,SP-D ELISA Kit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒 96T/48T
Monkey Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒 96T/48T
Mouse Epidermal growth factor,EGF Elisa Kit小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒96T/48T
Human immunoglobulin heavy chain variable region,IgHV ELISA Kit人免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒96T/48T
Human Pulmonary surfatcant-associated protein C,SP-C ELISA Kit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒96T/48T
Sheep Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit 綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒96T/48T
Mouse Immunoglobulin M,IgM Elisa Kit小鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒96T/48T
Human prealbumin,PA ELISA Kit人前白蛋白(PA)ELISA試劑盒 96T/48T
Human myelin basic protein autoantibody,MBP ELISA Kit人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒96T/48T
Sheep major histocompatibility complex,MHC ELISA Kit 綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒96T/48T
Mouse Immunoglobulin A,IgA Elisa Kit小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒96T/48T
Human heparin sulphate protoglycans,HSPG ELISA Kit人琉酸肝素糖蛋白(HSPG)ELISA試劑盒96T/48T
human lung cancer Marker ELISA Kit人肺癌標(biāo)志物ELISA試劑盒96T/48T
Sheep Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 綿羊白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 96T/48T
Mouse prostate specific antigen,PSA ELISA Kit小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒96T/48T
Human Cryoglobulin,CG ELISA Kit人冷球蛋白(CG)ELISA試劑盒96T/48T
human gastric carcinoma Marker ELISA Kit人胃癌標(biāo)志物ELISA試劑盒96T/48T
Sheep Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit 綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒96T/48T
Mouse Interleukin 2,IL-2 ELISA kit 小鼠白細(xì)胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒96T/48T
Human erythrocyte membrane protein,EMP ELISA Kit人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒96T/48T
Human Squamous Cell Carcinoma Antigen 2,SCCAg 2 ELISA Kit人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒96T/48T
Sheep Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit 綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒96T/48T
Mouse interleukin 8,IL-8 ELISA Kit小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒96T/48T
Human Methemoglobin,MHB ELISA Kit人高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒96T/48T
Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit人胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒96T/48T
heep Insulin ELISA kit綿羊胰島素ELISA試劑盒96T/48T
大鼠晶狀體蛋白αB(CRYαB)ELISA試劑盒
Human Hemoglobin C,HbC ELISA Kit人血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒 96T/48T
Human Cyclin-D2 ELISA Kit人細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA 96T/48T
Sheep SSEA-1 ELISA kit羊階段特異性表面抗原-1(SSEA-1)ELISA試劑盒96T/48T
Mouse chondroitin sulfate,CS ELISA Kit 小鼠琉酸軟骨素ELISA試劑盒96T/48T
Human Fibrin ELISA Kit人纖維蛋白(Fibrin)ELISA試劑盒 96T/48T
Human Cyclin-D1 ELISA Kit人細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒96T/48T
Sheep SSEA-3 ELISA kit羊階段特異性表面抗原-3(SSEA-3)ELISA試劑盒96T/48T
Mouse Calcitonin,CT ELISA Kit小鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒96T/48T
Human fibrinopeptide B,FPB ELISA Kit人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒 96T/48T
Human ferritin,FE ELISA Kit人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒96T/48T
Sheep Insulin-Like Growth Factor-I,IGF-I ELISA kit綿羊胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒96T/48T
mouse OVE-IsgE ELISA Kit小鼠抗卵白蛋白特異性IgE(OVE-IsgE)ELISA試劑盒96T/48T
Human plasminogen activator,PLGA ELISA Kit人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒 96T/48T
Human microtransferrinuria,MTF ELISA Kit人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒96T/48T
Sheep leptin ELISA kit綿羊瘦素(leptin)ELISA試劑盒96T/48T
Mouse Immunoglobulin G,IgG Elisa Kit小鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒96T/48T
Human Surface Membrane Immunoglobulin,SmIg ELISA Kit人細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA試劑盒 96T/48T
Human tissue inhibitor of metal protease 1,TIMP-1 ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒96T/48T
山羊白介素10(IL-10)試劑盒,規(guī)格:96T/48T保存:2-8℃用途:科研實驗檢測檢測標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。提供免費代測服務(wù)。山羊白介素10(IL-10)試劑盒,以其高品質(zhì)的質(zhì)量,良好的服務(wù)及實惠的價格贏得了客戶和科研機(jī)構(gòu)的青睞,我們竭誠期待新老客戶的來電!公司提供免費代測服務(wù),一周內(nèi)出結(jié)果,質(zhì)量,歡迎來電咨詢或索取說明書。
樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法微量加樣的性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時候一份標(biāo)本用相同的elisa試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。我公司其他小部分試劑:橄欖油/洋橄欖油/Olive oil但馬膠/但馬樹脂/達(dá)麻脂/達(dá)瑪膠/達(dá)瑪樹膠/娑羅雙樹脂/達(dá)馬樹脂/Gum dammar乳香膠/乳香/瑪?shù)蹣淠z/瑪?shù)壑?瑪?shù)蹣渲?瑪締脂/膠粘劑/乳香樹脂/瑪珶脂/粘膠乳香樹膠/膠粘水泥/Gum mastic山達(dá)膠/山達(dá)脂/非洲松香/檜膠/方苞非洲柏膠/Gum sandarac蟲膠/紫膠/蟲膠臘/紫蟲膠/漂白紫膠/Shellac柯柏膠/硬樹脂/礦樹脂/柯伯膠/柯帕樹脂/Gum copal中性樹膠/Neutral balsam植物凝膠/冷結(jié)樹酯/結(jié)冷膠/吡喃葡萄糖醛酸與6-脫氧-L-吡喃甘露糖和D-吡喃葡萄糖乙酸酯的聚合物鈣鉀鈉鹽/Phytagel歡迎咨詢:山羊白介素10(IL-10)試劑盒。 山羊丙酮檢測(acetone)試劑盒 Goat acetone 試劑盒 山羊γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 Goat Interferon γ ,IFN-γ 試劑盒 山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒 Goat Tumor necrosis factor α,TNF-α 試劑盒 山羊白介素2(IL-2)試劑盒 Goat Interleukin 2,IL-2 試劑盒 山羊白介素10(IL-10)試劑盒 Goat Interleukin 10,IL-10 試劑盒 山羊白介素4(IL-4)試劑盒 Goat Interleukin 4,IL-4 試劑盒 山羊生長激素釋放多肽(GHRP)試劑盒 Goat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP 試劑盒 山羊促生長激素釋放激素(GHRH)試劑盒 Goat growth hormone releasing hormone,GHRH 試劑盒 馬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/ELA)試劑盒 Horse major histocompatibility complex,MHC/ELA 試劑盒 馬免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 Horse Immunoglobulin E,IgE 試劑盒 馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒 Horse amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 試劑盒 馬β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒 horse Beta-Endorphin,β-EP 試劑盒 貓p27核心抗原(P27)試劑盒 Felis p27 core antigen,P27 試劑盒 貓細(xì)小病毒抗體(FPV)試劑盒 Felis parvovirus,FPV 試劑盒 貓α干擾素(IFN-α)試劑盒 Felis Interferon α,IFN-α 試劑盒 裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒 Nude mouse cyclooxygenase-2,COX-2 試劑盒 裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒 Nude mouse Alpha-fetoprotein,AFP 試劑盒 裸鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) 試劑盒 Nude Mouse Clara cell protein,CC16 試劑盒 裸鼠蛋白磷酸酶(PP)試劑盒 Nude Mouse Protein Phosphatase,PP 試劑盒 倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) 試劑盒 Hamster matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 K
豬白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 >>現(xiàn)貨供應(yīng)
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Elisa試劑盒規(guī)格:96T/48T
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Elisa試劑盒的原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
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白介素試劑盒,人白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒 人elisa試劑盒 進(jìn)口ELISA試劑盒 ELISA檢測試劑盒上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司專業(yè)試劑盒供應(yīng)商,代理商!【中文名稱】:人白介素10(IL-10)elisa試劑盒
【英文名稱】:HumanInterleukin10,IL-10ELISA Kit
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T。
【產(chǎn)品貨號】:YM-S0066。
【試劑盒成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等ELISA試劑盒檢測范圍:人、綿羊、山羊、牛、馬、小鼠、大鼠、豬、兔、其它動物細(xì)胞因子、植物細(xì)胞因子、細(xì)胞凋亡、活性多肽、自身抗體、血栓與止血、骨代謝、肝纖維化、腫瘤、激素內(nèi)分泌、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。
主要用于科研方面,不用于臨床診斷?梢杂糜跈z測各種指標(biāo)。
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白介素試劑盒,人白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒的若干特點:專一性強:抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。靈敏度高:由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。樣品易保存:經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
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人白介素10(IL-10)elisa試劑盒 參數(shù):
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F2369-A | 人白介素10(IL-10)elisa試劑盒 | Human Interleukin 10,IL-10 elisa KIT | 48T |
人白介素10(IL-10)elisa試劑盒 技術(shù)流程ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測 定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng) 而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行 定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。
主要優(yōu)點1、簡易操作、高效、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;5、節(jié)省實驗經(jīng)費。
使用方法1、 血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng) 在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟1:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗 滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于 450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。操作步驟2:間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;6.’最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
應(yīng)用信息ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個方面:1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。編輯本段進(jìn)口分裝進(jìn)口分裝:檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.99。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實驗結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種細(xì)胞因子,已被證實為B細(xì)胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細(xì)胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生長刺激等,也備受關(guān)注. 并且已證實白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報道多種疾病的生長因子為白介素-6, 骨髓瘤細(xì)胞能合成白介素-6并表達(dá)白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測小鼠血清和細(xì)胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運用了兩種特異性抗體,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測范圍 10.94 700 pg/mL [2]預(yù)期用途此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測試劑盒成分1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 13 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 15 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 16 顯色劑: TMB底物液 15mL x 17 終止液: 1N硫酸 12mL x 18 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)[3]
注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 個月