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人B因子ELISA試劑盒 人BF試劑盒免費代測

本產品僅供科研實驗,不得用于醫(yī)療或食用。 
人B因子elisa試劑盒                
人BF試劑盒   人BF ELISA KIT            
Human factor B,BF ELISA kit                
                 
產品中文: 人B因子(BF)ELISA試劑盒 
產品英文: Human factor B,BF ELISA kit
貨號: XF00253B
規(guī)格: 48T/96T
保質期: 6個月
保存條件: 2到8度
                 
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ELISA技術原理:以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來.
1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2. 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3. 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
4. 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記 的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
5. 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
6. 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量 與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定 性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),并且重復性好。
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ELISA試劑盒,品質保證!售前售中售后全程提供技術指導,有質量問題免費包退包換!提供免費代測服務,代測時間為5-7天,提供原始數據,分析數據!
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
                 
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操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/L,20ng/L ,10ng/L,5ng/L, 2.5ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
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人B因子ELISA試劑盒,人BF試劑盒
該公司產品分類: 動物紅細胞 合成多肽 細胞因子及重組蛋白 抗體/抗原 生化實驗代測服務 干擾物質 質控品 RIA試劑盒 生化法試劑盒 緩沖液染色液 ProSpec-Tany試劑 Merck試劑 Pharmacia試劑 Roche試劑 Bio-Rad試劑 spectrum試劑 sigma試劑 amresco試劑 生化試劑 其他種屬

人B因子ELISA試劑盒

人B因子ELISA試劑盒         

編號:JM21417E

英文名稱:Human factor B,BF ELISA KIT

ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經第二次孵育后,酶結合物就會與次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒 的測試標準, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性

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人B因子ELISA試劑盒  

Y10253A(BF)人B因子Elisa試劑盒

用途:本產品僅供科學研究

注意事項:1.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(×n×5)。2.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。3.底物請避光保存。4.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為Elisa 試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中

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KB1252A人B因子elisa試劑盒,BF試劑盒

關于人B因子elisa試劑盒和BF試劑盒的更多詳情歡迎來電垂詢及索取實驗說明書。產品名稱:人B因子(BF)elisa試劑盒
英文名稱:Human factor B,BF ELISA Kit
貨號:KB1252A
規(guī)格:96T/48T
保存條件:2-8℃,保存6個月。
用途:用于定量或定性檢測血清、血漿、組織液的液體樣本,不能含有沉淀物。人B因子elisa試劑盒,BF試劑盒檢測原理:本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被人B因子多克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中人B因子濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據標準品和樣品的OD值,計算樣本中人B因子含量。人B因子elisa試劑盒,BF試劑盒類似產品:   人彈性蛋白elisa試劑盒,Elastin試劑盒      大鼠抗增殖細胞核抗原抗體elisa試劑盒,PCNA試劑盒      人葉酸elisa試劑盒,F(xiàn)A試劑盒      人彈性蛋白elisa試劑盒,Elastin試劑盒      人抑制素Belisa試劑盒,INH-B試劑盒      大鼠核因子-κB亞基p65親和肽elisa試劑盒,NF-κB p65試劑盒      人環(huán)磷酸腺苷elisa試劑盒,cAMP試劑盒      犬肌鈣蛋白Ⅰelisa試劑盒,Tn-Ⅰ試劑盒      豚鼠主要組織相容性復合體elisa試劑盒,MHC/GPLA試劑盒      大鼠apelin 12elisa試劑盒,AP12試劑盒      小鼠生長因子elisa試劑盒,GH試劑盒      兔子堿性成纖維細胞生長因子elisa試劑盒,bFGF試劑盒      植物維生素Aelisa試劑盒,VA試劑盒      人血管內皮細胞粘附分子1elisa試劑盒,VCAM-1/CD106試劑盒      小鼠γ氨基丁酸elisa試劑盒,GABA試劑盒      牛的牛小腸堿性磷酸酶elisa試劑盒,CIAP試劑盒      大鼠N端前腦鈉素elisa試劑盒,NT-proBNP試劑盒      小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢaelisa試劑盒,GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61試劑盒      人α-輔肌動蛋白3elisa試劑盒,ACTN-3試劑盒      魚類皮質醇elisa試劑盒,Cortisol試劑盒      犬血栓前體蛋白elisa試劑盒      人抗可溶性肝抗原抗體elisa試劑盒      人生長激素釋放因子elisa試劑盒      犬血栓前體蛋白elisa試劑盒      人腺相關病毒elisa試劑盒      大鼠E選擇素elisa試劑盒      人巨噬細胞炎性蛋白1βelisa試劑盒      人結蛋白elisa試劑盒      人脂磷壁酸elisa試劑盒      小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類elisa試劑盒      人艾杜糖硫酸酯酶elisa試劑盒      小鼠白介素16elisa試劑盒      人維生素B6elisa試劑盒      大鼠胃蛋白酶elisa試劑盒      大鼠白介素6elisa試劑盒      大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgAelisa試劑盒      人乙酰膽堿elisa試劑盒      小鼠基質細胞衍生因子1βelisa試劑盒      大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子4elisa試劑盒      人胰島素樣生長因子結合蛋白2elisa試劑盒   關鍵詞:人B因子elisa試劑盒   BF試劑盒

人B因子elisa試劑盒科研

 產品資料

【產品名稱】:人B因子elisa試劑盒科研

【英文名稱】:Human factor B,BF elisa Kit

【檢測種屬】:大鼠等動植物。

【產品用途】:被測樣品定性或定量分析

【產品規(guī)格】:48T 

【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)

【保存條件】:2-8℃

【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應)

【產品性狀】:液體盒裝

【服務優(yōu)勢】:全程提供ELISA實驗技術指導和elisa試劑盒免費代測

【樣本儲存】:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

人B因子elisa試劑盒科研洗滌方法:

1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。

1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?瞻卓准訕悠废♂屢100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。

3.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。

5.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。

7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。本公司專業(yè)經銷人B因子elisa試劑盒科研長期為全國科研機構、高校和科研人員提供優(yōu)質產品,在保證產品質量的同時,我們還配有扎實的售后技術咨詢和服務,歡迎來電咨詢。

人B因子elisa試劑盒

 本公司銷售的人B因子elisa試劑盒,僅適用于科研實驗、科學研究等領域,不得用于臨床診斷。
人B因子elisa試劑盒測定技術的發(fā)展:
臨床測定技術的發(fā)展主要在于方法學的發(fā)展,而方法學的發(fā)展依托于試劑生產技術不斷進步更新和型標記物的應用。目前,分子生物學正在并最終肯定會讓我們對整個生命科學有一個全面而徹底的認識,其對免疫測定技術發(fā)展的影響也是直接而又有效的,它使我們對以前一些難以檢測的生物活性物質的測定變得輕而易舉,并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。
人B因子elisa試劑盒經驗技術是很重要的,常見的ELISA常見技術指南:
1.選擇抗體時最好選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;最好從同一家公司選擇抗體對。
2.ELISA實驗中為了確定最佳信號和最低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
3.標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復溶。
4.一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml?衫脴藴实腅LISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內提高靈敏度。
5.為了優(yōu)化靈敏度,建議過夜孵育標準品和標本。
6.若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7.當測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。
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性狀:盒裝液體

適應:科研實驗

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人B因子elisa試劑盒 說明書

產品介紹

人B因子elisa試劑盒 參數:

編號 中文名稱 英文名稱 規(guī)格
F2556-B 人B因子elisa試劑盒 Human factor B,BF elisa Kit 96T
一:人B因子elisa試劑盒 產品參數
編號 中文名稱 英文名稱 規(guī)格
F2556-B 人B因子elisa試劑盒 Human factor B,BF elisa Kit 96T
二:人B因子elisa試劑盒 操作方法

人B因子elisa試劑盒 廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中,我們來介紹一下更簡便的操作說明,編號:F2556-B,英文名稱Human factor B,BF elisa Kit

1、人B因子elisa試劑盒 操作方法一用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。 (2).加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 (3).加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。 (4).加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 (5).終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。  

2、人B因子elisa試劑盒 操作方法二:用于檢測未知抗體的間接法: (1).用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 (2).加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)(3).于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。 (4).于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘 (5).于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點,已廣泛應用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子等領域。  

3、臨床標本的收集和保存 用于ELISA測定的臨床標本最為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集,要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結果產生影響。如可的松在早晨4~6點之間,會有一峰值出現(xiàn):生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式釋放,因此,在測定此類激素時,有必要在密切相連的時間間隔內采取數份血樣本,以其中間值為測定值。又如當從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r,血清中腎素活性將出現(xiàn)明顯增高。再如治療藥物的檢測,應根據藥代動力學選擇服藥后的最適時間抽血檢測。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物和特種蛋白等的檢測的血清標本的收集則沒有時間和體位方面的影響,只是在處理和保存方面要考慮。

(1)要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。(3)血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。(4)冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。(5)標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。 

4、試劑準備 在臨床實驗室,對試劑準備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現(xiàn)假陰性。因此在ELISA測定中試劑的準備最為關鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應步驟中,能使反應微孔內的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應保證質量。此外,當試劑盒以OPD為底物時,則底物溶液應在反應顯色前臨時配制。

三、加血清樣本及反應試劑

在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是唯一的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產生污染。出現(xiàn)氣泡則反應液界面有差異。試劑的加入在國產試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。

四、溫育

溫育是ELISA測定中影響測定成敗最為關鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結合反應在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結合,必須在一定的溫度條件下反應一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。最為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。溫育這一步是臨床ELISA測定中最容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內ELISA商品試劑盒的反應溫育時間為37℃ 30分鐘~1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1~2小時才能有較完全的結合,低于1小時,可能會影響測定下限。因此,關于溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:要保證在設定的溫度下有足夠的反應時間。一般來說,加完樣本和/或反應試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HBsAg測定的室內質控中,測定由衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應的1 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內溫度較低有關,此時微孔板轉入溫箱后37℃溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內溫度才能達到37℃,從而適當延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計放置板孔反應溶液中測量觀察即可。

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英文名稱:Human factor B,BF ELISA Kit
貨號:KB1252A
規(guī)格:96T/48T
保存條件:6個月,2-8℃。
用途:用于定量或定性檢測樣本(血清、血漿、組織液等液體),只能用于科研實驗,不可以用于臨床診斷。人B因子elisa試劑盒,BF測試盒實驗原理:本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被人B因子多克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中人B因子濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據標準品和樣品的OD值,計算樣本中人B因子含量。人B因子elisa試劑盒,BF測試盒更多相關產品>>>請點擊elisa試劑盒關鍵詞:人B因子elisa試劑盒   BF測試盒

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