IFN-γR1-CDw119 酶免試劑盒
本公司銷售各種屬Elisa試劑盒,抗體抗原,標(biāo)準(zhǔn)品對照品。酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒所需要樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右 (2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清 。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 上海研鑫生物科技有限公司專業(yè)提供科研類進(jìn)口原裝、進(jìn)口分裝全系列ELISA試劑盒,是多家科研機(jī)構(gòu)和高校指定ELISA試劑盒供應(yīng)商,歡迎各位新老客戶惠顧!如需咨詢相關(guān)產(chǎn)品信息,聯(lián)系在線客服QQ1833133586 更多相關(guān)產(chǎn)品請點(diǎn)擊公司網(wǎng)址:www.shyxsw.net
人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPARγ)elisa檢測試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的含量。試劑盒嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試劑不同批號組分不得混用。
ELISA法測定試劑盒參數(shù)規(guī)格:
中文名稱:人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPARγ)elisa檢測試劑盒
規(guī)格:96T/48T
性狀:液體
存儲:4℃保存6個月
運(yùn)輸方式:快遞發(fā)貨
檢測標(biāo)本:血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清,組織勻漿等
檢測方法:雙抗夾心法
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上海常斤生物ELISA試劑盒廠家主營如下:
試劑盒:大鼠Elisa試劑盒,小鼠Elisa試劑盒,人Elisa試劑盒,犬Elisa試劑盒,魚Elisa試劑盒,雞Elisa試劑盒,牛Elisa試劑盒、其他動物類Elisa試劑盒、植物Elisa試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、 免疫組化試劑盒、金標(biāo)檢測試劑盒、生化試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒。
抗體:一抗、二抗、進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體;免疫組化抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體。抗體:一抗、二抗、進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體;免疫組化抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體。
動物血清:內(nèi)皮細(xì)胞專用血清、GIBCO胎牛清、HyClone。動物血清:內(nèi)皮細(xì)胞專用血清、GIBCO胎牛清、HyClone。
細(xì)胞:原裝進(jìn)口細(xì)胞、正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞。細(xì)胞:原裝進(jìn)口細(xì)胞、正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞。
酶聯(lián)免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay(簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。
酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒工作原理:
1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達(dá)到很高的敏感度。
酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒使用方法:
夾心法
夾心法常用于檢測大分子抗原,一般之操作步驟為:
1、將具有專一性之抗體固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體;
2、加入待測檢體,檢體中若含有待測之抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié);
3、洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一之一次抗體,與待測抗原進(jìn)行鍵結(jié);
4、洗去多余未鍵結(jié)一次抗體,加入帶有酵素之二次抗體,與一次抗體鍵結(jié);
5、洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酵素受質(zhì)使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果。
間接法
間接法常用于檢測抗體,一般之操作步驟為:
1、將已知之抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余之抗原;
2、加入待測檢體,檢體中若含有待測之一次抗體,則其會與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié);
3、洗去多余待測檢體,加入帶有酵素之二次抗體,與待測之一次抗體鍵結(jié);
4、洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酵素受質(zhì)使酵素呈色,藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗體的含量。
競爭法
競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機(jī)制,一般用于檢測小分子抗原,其操作步驟為:
1、將具有專一性之抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體;
2、加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié);
3、加入帶有酵素之抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酵素之抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結(jié),即所謂競爭法之由來;
4、洗去檢體與帶有酵素之抗原,加入酵素受質(zhì)使酵素呈色,當(dāng)檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酵素的抗原越少,顯色也就越淺。
當(dāng)需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原,或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時,一般會考慮使用競爭法ELISA。
酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒結(jié)果判斷:
定性測定
定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標(biāo)本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度,其實(shí)質(zhì)仍是一個定性試驗(yàn)。在這種半定量測定中,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),呈陽性反應(yīng)的最高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽性、弱陽性更具定量意義。
在間接法和夾心法ELISA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。
定量測定
ELISA操作步驟復(fù)雜,影響反應(yīng)因素較多,特別是固相載體的包被難達(dá)到各個體之間的一致,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,曲線最高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,繪制時常用半對數(shù)紙,以檢測物的濃度為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),將各濃度的值逐點(diǎn)連接,所得曲線一般呈S形,其頭、尾部曲線趨于平坦,中央較呈直線的部分是最理想的檢測區(qū)域。
測定小分子量物質(zhì)常用競爭法,其標(biāo)準(zhǔn)曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。ELISA測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線注意圖中橫坐標(biāo)為對數(shù)關(guān)系,這更有利于測定系統(tǒng)的表達(dá)。
現(xiàn)在訂購試劑盒享有更多優(yōu)惠活動,提供免費(fèi)待測服務(wù),全程提供技術(shù)支持,產(chǎn)品質(zhì)量保證,性價比高,售后有保障,歡迎新老客戶咨詢訂購:人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPARγ)elisa檢測試劑盒。
主要特點(diǎn):
1、用于檢測γ(X)射線
2、小巧精致,筆形結(jié)構(gòu)方便使用者隨身佩戴
3、數(shù)字顯示,易于讀數(shù),讀數(shù)自動保存
4、操作方便
1、檢測射線:γ(X)射線
2、傳感器:硅半導(dǎo)體
3、測量范圍: 1-9999 μSv
4、能量范圍: ≥40 keV
5、能量反應(yīng):±30%(50KeV-3MeV)
6、精確度: ±10% (1 to 9999 uSv)
7、線性:±10%(0.1Sv/h以下) ,±20%(0.1-0.3Sv/h)
8、顯示:4位數(shù)顯、數(shù)據(jù)存儲、超量程、低電量指示
9、尺寸:30×145×12mm
10、重量:50 g
11、環(huán)境溫濕度:溫度0~45℃,最大相對濕度90%
技術(shù)指標(biāo):
1、檢測射線:γ(X)射線
2、傳感器:硅半導(dǎo)體
3、測量范圍: 1-9999 μSv
4、能量范圍: ≥40 keV
5、能量反應(yīng):±30%(50KeV-3MeV)
6、精確度: ±10% (1 to 9999 uSv)
7、線性:±10%(0.1Sv/h以下) ,±20%(0.1-0.3Sv/h)
8、顯示:4位數(shù)顯、數(shù)據(jù)存儲、超量程、低電量指示
9、尺寸:30×145×12mm
10、重量:50 g
11、環(huán)境溫濕度:溫度0~45℃,最大相對濕度90%